桉叶提取物抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的分离纯化及其动力学研究

摘要

为了对尾巨桉属广林9号品种桉叶提取物进行体外抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)活性研究,并对其主要活性成分进行分离纯化、结构鉴定及抑制动力学研究.采用高效液相色谱法(HPLC)检测酶反应生成尿酸的量,以甲醇-K2HPO4缓冲液(50 mmol/L,pH值7.5)(5∶95)为流动相,检测波长为290 nm,测定了桉叶的不同溶剂提取物及其萃取组分对XOD活性的抑制作用,确定了最佳提取条件,并采用Diaion HP-20大孔树脂、反相硅胶柱层析法和制备液相色谱仪进行分离纯化.确定桉叶中最高活性单体为鞣花酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷酸和五没食子酰葡萄糖,测得其IC50分别为22.51、32.96、31.75 μg/mL;并通过酶抑制动力学试验比较了他们的抑制类型和Ki值,得出鞣花酸的Ki值最小、为1.048 μg/mL,可知其抑制黄嘌呤氧化酶活性效果在3种活性单体中最优.