腺病毒介导慢病毒载体的细胞转染

摘要

目的尝试利用腺病毒介导慢病毒载体的细胞感染以提高转染效率.方法以多聚赖氨酸粘合腺病毒和慢病毒载体形成复合体后感染Hela细胞,测定慢病毒载体目的基因表达的变化并用激光共聚焦扫描显微镜观察慢病毒载体的细胞摄入情况,进一步了解抗腺病毒衣壳球部的抗体能否干扰这种变化以证明腺病毒是否参与此介导作用.结果携带大肠埃希菌半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)基因的慢病毒载体Lenti-VSVG对Hela细胞的感染率非常低,通过多聚赖氨酸与腺病毒(AdenoPL)形成复合体后感染率显著上升并呈剂量依赖性.激光共聚焦扫描显微镜显示Lenti-VSVG被细胞摄取的数量在和腺病毒粘合后显著增加.抗腺病毒衣壳球部抗体能抑制直至阻断Lenti-VSVG/AdenoPL复合体两者各自携带基因(分别是β-gal和荧光素酶/绿色荧光蛋白融合蛋白)的表达.结论通过多聚赖氨酸的物理连接,腺病毒能介导慢病毒载体的细胞摄入从而提高转染效率.