邻苯二甲酸二丁酯暴露对大型溞miR-153及AKT基因表达的影响和功能分析

摘要

microRNAs参与调控动物所有的生命过程,包括生长、发育、生物和非生物应激反应等。microRNAs与其调控的靶基因已被证实参与水生动物对环境胁迫的应答。为了探究miR-153的生物学功能及邻苯二甲酸二丁酯(DBP)暴露对大型溞miR-153及其靶基因AKT表达的影响,我们对各物种miR-153序列进行多序列比对,利用miRanda和TargetScan分析miR-153的靶基因并对其进行功能富集分析,实时荧光定量PCR检测了miR-153和AKT在DBP暴露后大型溞体内的表达变化。结果显示,多序列比对发现11个物种miR-153基因序列保守性很高,20个碱基完全一致;miR-153的742个靶基因,主要富集在DNA模板和转录调控、氧化还原和信号转导等生物学过程,且靶基因参与胞吞、平滑肌收缩、细胞色素P450对异生素的代谢等代谢信号通路的调节;不同浓度、不同时间的DBP暴露后,与对照组相比,大型溞miR-153表达量出现了极显著上升(p < 0.01),AKT基因的表达量与之相反,表现出miR-153和AKT的负调控关系。结果表明,在DBP暴露下miR-153可能通过靶向AKT基因,影响AKT下游相关基因的表达,导致AKT参与的大型溞生命活动失调,本实验为解析DBP对水生动物的毒理机制提供科学参考。