两步法制备高活性酪蛋白ACE抑制肽的工艺参数研究

摘要

为了制备高活性ACE抑制肽,研究两步法高活性酪蛋白ACE抑制肽的制备工艺条件参数.利用枯草杆菌碱性蛋白酶55℃水解酪蛋白6h制备酪蛋白ACE抑制肽,IC50为38.6μ g/mL;采用相同的酶进行Plastein反应来修饰酪蛋白ACE抑制肽,并应用响应面分析法优化修饰反应条件.固定酪蛋白ACE抑制肽质量分数为35%,以ACE抑制肽的游离氨基减少量为指标,优化的修饰反应条件为酶添加量7.7kU/g蛋白质、温度42.7℃、反应时间6h,在此条件下,酪蛋白ACE抑制肽的游离氨基减少量达到179.72μmol/g蛋白质.ACE抑制活性分析结果表明,修饰后ACE抑制肽的抑制活性显著提高且与修饰反应程度相关,IC50可降至0.5μg/mL.