咪达唑仑调控PI3K/AKT信号通路对高糖诱导心肌细胞氧化应激和凋亡的影响

摘要

目的 探讨咪达唑仑是否通过磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路调控高糖诱导心肌细胞氧化应激和凋亡.方法 心肌细胞H9C2采用35 mmol/L葡萄糖诱导损伤,并给予低、中、高(5、10、20 ng/mL)剂量的咪达唑仑或10 μmol/L PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002,细胞分为对照组、高糖组、高糖+低剂量药物组、高糖+中剂量药物组、高糖+高剂量药物组、高糖+ LY294002组,高糖+高剂量药物组+LY294002组.CCK-8检测细胞活性,流式细胞术评估细胞凋亡,Western blot分析Caspase3、磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)、AKT的表达,比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 与对照组相比,高糖组心肌细胞H9 C2的活性、SOD活性、p-H3K和p-AKT蛋白表达量降低,细胞凋亡率、Caspase3蛋白表达量、MDA含量升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05),PI3K和AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).与高糖组相比,10、20 ng/mL剂量的咪达唑仑增强高糖诱导的心肌细胞H9C2的细胞活性、SOD活性、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平,并减弱凋亡率、Caspase3蛋白表达水平和MDA含量,差异均有统计学意义(P均＜0.05),而PI3K和AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).与高糖组相比,LY294002和高糖处理的心肌细胞H9 C2的细胞活性、SOD活性减少,细胞凋亡率、Caspase3蛋白表达量、MDA含量增加,差异均有统计学意义(P均＜0.05).咪达唑仑对高糖诱导的心肌细胞活性、细胞凋亡和氧化应激的影响被LY294002所减弱.结论 咪达唑仑通过激活PI3K/AKT信号通路,增强高糖诱导的心肌细胞活性,抑制细胞凋亡并减轻氧化应激.