低氧状态下海马神经元细胞信号转录因子和活化子3,5的基因表达状况

摘要

目的:探讨 STAT3, 5基因在缺氧性海马神经元细胞损伤中的可能作用. 方法:分离新生 Wistar大鼠双侧海马进行体外培养,采用 Tripure试剂提取海马神经元细胞的总 RNA,自行设计大鼠 STAT3, STAT5和阳性对照 HPRT的 PCR引物序列,通过半定量的逆转录多聚酶链反应( RT-PCR)技术检测常氧组、低氧 2, 6, 12 h组海马神经元细胞的 STAT3和 STAT5基因的表达水平;采用 PCR产物纯化试剂盒纯化 PCR产物,而后用四色荧光法直接测序. 结果:图像分析结果显示低氧培养 2 h组海马神经元细胞中 STAT3, 5 mRNA表达水平升高,目的片段与 HPRT的光密度比值分别为 0.57± 0.11和 0.64± 0.09,在低氧 6 h组( 0.85± 0.14和 0.86± 0.11)达最高,与正常组( 0.34± 0.12和 0.40± 0.08)比较差别均有显著性意义( t=- 24.59～- 7.37, P< 0.01).低氧 12 h组的表达量低于 6 h组,但高于正常组( P< 0.01).测序显示, PCR扩增的产物 STAT3, STAT5与大鼠 Genbank中的序列完全一致. 结论:低氧增强海马神经元细胞中 STAT3, 5基因的表达,在低氧所致的脑损伤中可能发挥重要作用.