红藻氨酸致痫后脑海马神经元凋亡与黑质多巴胺受体D1及D2拮抗剂的干预作用(英文)

摘要

背景:多巴胺在中枢神经系统内与癫痫的发生及传导有密切关系,它的不同作用是特异的受体决定的。目的:建立颞叶癫痫模型。探讨黑质内给予多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390及D2受体拮抗剂氟哌啶醇对红藻氨酸所致的颞叶癫痫发作和脑电活动的影响。设计:随机对照的验证性实验。单位:南方医科大学附属珠江医院神经医学研究实验室。材料:实验于2004-08/12在解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所进行,选择成年雄性SD 大鼠30只,体质量250～300g。方法:①30只大鼠随机分为生理盐水对照组6只,红藻氨酸组6只和实验组18只,实验组大鼠又分为3个亚组,多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390+红藻氨酸组,多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇+红藻氨酸组,生理盐水+红藻氨酸组,每组6只。生理盐水对照组单独右侧脑室注入生理盐水2μL,红藻氨酸组予右侧脑室注入红藻氨酸2μL,实验各组分别给予多巴胺D1受体拮抗剂SCH 23390、多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇、生理盐水1μL 注入右侧黑质,同时红藻氨酸2μL 注入右侧脑室。②观察项目:实验各组给药后第0.5,1,2,6,24小时脑电图变化犤以未出现癫痫样行为时脑电图为对照,当出现尖波、棘波、尖(棘)慢综合波、多棘慢波时判定为痫性活动犦;动物行为变化(0级为正常;I级出现湿狗样颤动,面肌阵挛,如眨眼、动须及节律性咀嚼等;Ⅱ级呈节律性点头;Ⅲ级表现为前肢阵挛;Ⅳ级站立伴双侧前肢阵挛;V 级跌倒、失平衡,四肢抽搐);观察脑海马部神经细胞凋亡情况:于给药5d 后处死大鼠,取脑海马切片作原位末端标记染色后检测。主要观察指标:①癫痫发生前后的大鼠行为变化以及脑电图改变。②脑海马神经细胞凋亡结果。结果:30只大鼠均进入结果分析。①癫痫发作情况:生理盐水组无癫痫发作。红藻氨酸组大鼠均出现癫痫发作,发作于脑室注射红藻氨酸后10m in开始,1h 达高峰,3～6h 后停止。②脑电图记录:生理盐水对照组无尖波、棘波、棘慢综合波等痫性电活动表现,红藻氨酸组于注射后10m in 即有痫性波出现,1h 左右癫痫发作达高峰,3～6h 后波幅降低,出现阵发性慢波及棘慢波;12h 后无痫性波出现。③神经元凋亡情况:生理盐水组注射后海马部可见极少神经细胞凋亡;红藻氨酸组注射后5d ,在海马部可见到明显神经细胞凋亡(P =0.00)。黑质内给予多巴胺D1受体拮抗剂SCH 23390后,海马部细胞凋亡减轻不明显(P >0.05);给予多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇后,海马部细胞凋亡加重(P =0.00)。结论:黑质中注入多巴胺D1受体拮抗剂SCH 23390后,不能阻止红藻氨酸所致癫痫的发生,发作后的痫性电活动没有明显减弱,给予多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇后,红藻氨酸所致癫痫痫性电活动增强,脑海马CA3区的细胞凋亡有明显增加。说明在黑质中参与颞叶癫痫调节作用的主要是多巴胺D2受体而不是D1受体。