RNA干扰survivin基因提高淋巴瘤细胞对阿霉素的敏感性

摘要

目的:探讨RNA干扰下调Burkitt淋巴瘤Daudi细胞系凋亡抑制基因survivin的表达对阿霉素敏感性的影响.方法:构建survivin发夹RNA(shRNA)真核表达载体,脂质体介导转染Daudi细胞.多重RT-PCR检测survivin mRNA表达;Western blotting检测Survivin蛋白表达;流式细胞仪(FCM)检测干扰前后细胞凋亡率;MTT法检测干扰前后细胞对化疗药物阿霉素(adriamycin, ADR)敏感性变化.结果:与无功能control-shRNA处理组和PBS处理组比较,转染survivin-shRNA细胞的survivin mRNA和蛋白表达率显著降低,抑制率分别为62.32%和61.88%(P<0.05);FCM结果示转染组细胞凋亡指数(apoptosis index, AI)显著高于两对照组(P<0.05);MTY结果显示,转染组细胞的阿霉素半数抑制浓度(IC50)为(0.25±0.43)μmol/L,显著低于无功能control-shRNA处理组(0.87±0.21)μmol/L和PBS处理组(0.91±0.36)μmol/L,P<0.05;相同剂量ADR对转染细胞的生长抑制率明显高于PBS组和control组.结论:发夹RNA干扰survivin基因可显著提高Daudi细胞凋亡率和对化疗药物阿霉素的敏感性.