低氧对成骨生长肽诱导的小鼠间充质干细胞成骨分化的影响

摘要

目的 探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响.方法 将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1％O2组(B组,1％O2条件下培养);OGP组(C组,常氧条件下添加OGP培养)、1％O2联合OGP组(D组,1％O2条件下添加OGP).分别于培养后1天、2天、3天、4天收集细胞,噻唑蓝(Methyhhiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法观察BMSCs增殖能力;培养7、14天后收集细胞,可见光比色法检测细胞碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP);培养1天后收集细胞,ELISA法检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)表达,培养3、7天后收集细胞,实时荧光定量PCR检测RUNX2、Osterix表达.结果 MTT结果显示,与C组相比,在培养第2、3、4天D组能明显促进BMSCs增殖(P＜0.05).与C组相比,在培养第7、14天D组能明显上调ALP表达(P＜0.05).与C组相比,在培养第3、7天D组能明显上调RUNX2、Osterix信使RNA表达(P＜0.05).在培养后1天,A组及C组未能检测到HIF-1α蛋白,B组与D组HIF-1α表达明显增加(P＜0.001).结论 低氧明显增强了OGP促进BMSCs增殖及成骨分化的作用.