荧光定量聚合酶链反应检测杜克雷嗜血杆菌的实验研究及临床应用

摘要

目的:建立荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测杜克雷嗜血杆菌(HD)的方法,并作临床应用评价.方法根据HD的基因库序列设计引物对2株参考株进行扩增,证实其特异性;再以10倍稀释不同浓度模板扩增测定其敏感度;同时检测76份生殖器溃疡处分泌物标本,每份标本同时作HD涂片和培养.结果:2株不同来源的HD参考株均出现特异性扩增片段,扩增片段大小为60 bp;其敏感度为10拷贝/μ1.将FQ-PCR用于检测76例HD培养阴性的生殖器溃疡分泌物标本,结果4例阳性.结论:FQ-PCR是一种高灵敏度、高特异性和高精确性的检测生殖器溃疡标本中HD的实验诊断方法,可用于临床诊断HD感染.