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仿生电刺激在体外促进人骨髓间充质干细胞株向肝细胞分化的研究

         

摘要

目的探讨仿生电刺激体外诱导人骨髓间充质干细胞株(UE7T-13)向肝细胞分化的作用。方法采用静电纺丝及氧化聚合法制备聚吡咯/PLGA导电膜,并在其表面培养UE7T-13细胞株。实验按是否给予诱导因子及施加电刺激分为四组:电刺激+诱导因子组、电刺激组、诱导因子组以及空白对照组。诱导因子包括HGF、EGF、FGF及OSM等。电刺激为每日给予频率5 Hz、脉宽5 ms、电压100 mV(电流强度100μA)的仿生电刺激2 h。每天常规收集培养液,检测其中白蛋白分泌、尿素合成、细胞色素P450活性。MTT法检测细胞增殖能力,细胞免疫荧光方法检测各组干细胞中自蛋白和甲胎蛋白的表达。结果电刺激+诱导因子组及诱导因子组UE7T-13细胞均成功诱导出类肝样细胞。与单纯诱导因子组比较,电刺激+诱导因子组UE7T-13更早向肝细胞转化,其肝细胞特异功能表达及表面特异蛋白分子表达更强。UE7T-13细胞在有电刺激存在时增殖能力明显提高。结论仿生电刺激可促进体外UE7T-13细胞增殖及其肝向分化,使其更早出现肝细胞特异性分子表达,并提高分化效率。

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