RNA干扰cAMP反应元件结合蛋白对碱性成纤维细胞生长因子诱导的人卵巢癌细胞Bcl-2表达的影响

摘要

目的：探讨cAMP反应元件结合蛋白（ CREB）是否介导碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF）诱导的人卵巢癌 CAOV3细胞 Bcl-2的表达。方法分为①空白对照组，阴性对照组，siRNA CREB组。脂质体转染干扰序列72 h，RT-PCR、Western印迹检测 CREB表达并鉴定转染最佳浓度。②对照组，bFGF组，bFGF＋siRNA组。转染48 h后饥饿培养24 h。 RT-PCR，Western印迹检测 Bcl-2表达。倒置显微镜下观察细胞生长及形态改变，MTT法检测细胞增殖。结果①与两对照组相比，siRNA CREB 明显抑制 CREB mRNA及蛋白表达（P＜0.01），100 nmol／L抑制效果最佳。②与对照组相比，bFGF组明显促进细胞生长，上调Bcl-2表达，bFGF＋siRNA CREB组则部分抑制bFGF的作用（P＜0.01）。结论 bFGF可能部分通过CREB调节人卵巢癌CAOV3细胞Bcl-2的表达，参与细胞的生存及增殖调控。