RNA干涉干扰素调节因子-1和CD74可抑制因高糖所致自发高血压大鼠大血管平滑肌细胞的过度增殖

摘要

目的:探讨特异性iRNA下调干扰素调节因子-1(IRF-1)及CD74表达对高糖所致自发高血压大鼠源大血管平滑肌细胞的过度增殖的影响.方法:合成特异性IRF-1及CD74的RNA干扰片段,并将其插入载体pGSsi-U6/Neo/GFP以构建重组载体.借助Lipofectmine2000,将重组载体转染自发高血压大鼠源大血管平滑肌细胞,然后将细胞置于高糖环境培养.细胞计数、MTT法及PCNA表达以检测平滑肌细胞的增殖能力.结果:携带特异性干扰IRF-1和CD74片段的重组质粒,经Lipofectmine2000转染后,分别见88.9%和80.5%的平滑肌细胞显示绿色荧光.与对照组相比,RNA干扰后,CD74和IRF-1的表达降至9.2%和4.2%.CD74和IRF-1表达的缺失导致细胞活力和PCNA表达的显著下调.MTT法的结果显示,IRF-1干扰引起平滑肌细胞OD的限制下降,但类似的结果在CD74干扰组中未见.结论:上述结果提示IRF-1和CD74基因与糖尿病大血管病变相关,或可作为该疾病的治疗靶点.