司帕沙星人工抗原合成及鼠源多克隆抗血清的制备

摘要

为合成并鉴定司帕沙星(Sparfloxacin,SPFX)人工抗原,制备出相应的鼠源多克隆抗体.采用DCC法将半抗原SPFX与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫原SPFX-BSA和包被原SPFX-OVA,采用UV和SDS-PAGE鉴定与分析;用小鼠进行免疫,采用间接ELISA测定多抗血清效价、阻断ELISA鉴定其抑制.结果表明,SPFX与BSA偶联后,波峰右移,并且SDS-PAGE电泳中BSA的泳动速度大于SPFX-BSA,初步说明SPFX与BSA偶联成功;6只小鼠血清效价均达到1×10 4以上,且3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制质量浓度(IC50)为237.36 μg/L.通过系列鉴定,成功制备出司帕沙星免疫原和包被原,获得高效价、特异性好、亲和力较高的鼠源抗SPFX多克隆抗体血清.