先天性眼球震颤遗传家系GPR143基因突变的鉴定研究

摘要

目的:
　　1.对一个X染色体连锁隐性遗传中国人先天性眼球震颤(CN)家系的临床表型以及遗传特性进行研究，提取被研究家系成员的基因组DNA，建立临床资料与血标本库。
　　2.筛查本研究家系的致病基因，将参与研究的CN-HN001家系成员的基因组DNA行测序分析，定位致病突变。
　　3.分析本研究CN-HN001家系的致病突变位点所引起的编码蛋白的改变。
　　方法:
　　1.CN-HN001家系的资料采集:采集受试者的基本信息、临床表型、遗传特征、签署知情同意书，进行详细的眼科检查，确定家系遗传方式并绘制遗传系谱图，分析整理临床资料并建档。受试成员抽取外周静脉血并进行基因组DNA提取，经纯度鉴定符合标准后再置入-80℃冰箱留存备用。
　　2.采用芯片捕获高通量测序技术对CN-HN001家系先证者的DNA进行检测并比对基因组数据库中的DNA序列，从候选基因中筛查出本家系的致病基因，并对致病突变位点进行筛查。
　　3.采用Sanger测序技术对先证者疑似基因的突变位点进行验证，并在家系内成员以及家系外成员中均采用Sanger测序验证。
　　4.初步分析致病基因上的新突变对编码蛋白的影响。
　　结果:
　　1.根据遗传特征明确该研究CN-HN001家系为一个X染色体连锁隐性遗传CN家系;提取了所有受试者的基因组DNA并鉴定其纯度均达标;规范建立了家系的临床资料库及血标本库。
　　2.先证者的DNA样本检测显示其在GPR143基因上第4号外显子之后的剪切区存在一个可疑致病突变，为半合子剪接突变c.360+5G＞T。
　　3.先证者发现的疑似致病突变行Sanger测序后证实存在。经家系内验证该突变呈现表型与基因型共分离，明确此突变为该研究CN-HN001家系的致病突变。经100个家系外正常健康人群验证均没有发现此突变位点。
　　4.GPR143基因上的突变最终造成了其编码蛋白氨基酸种类发生改变，从而导致致病性。
　　结论:
　　1.本研究家系为一个X染色体连锁隐性遗传CN家系;家系临床资料库及血库的建立为后续研究提供了保障。
　　2.本研究发现了GPR143基因在中国人CN家系中的新的突变位点剪接突变c.360+5G＞T，并对此位点进行成功的定位，各基因组数据库及国内外文献均未见报道。丰富了GPR143基因的突变谱。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

参考文献

第一部分 先天性眼球震颤家系的临床表型分析及血标本库的建立

资料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分 CN-HN001家系致病基因的鉴定研究

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

文献综述 先天性眼球震颤的分子遗传学研究进展

攻读学位期间发表文章情况

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