EGFR信号通路影响食管癌放射线敏感性的机制研究

摘要

食管癌在中国是一种常见的癌症，据报道，在2015年，中国每10万人中就有477.9人罹患食管癌(Chen eta1.，2016)。目前食管癌的治疗普遍采用手术或放疗为主、化疗为辅的治疗模式。临床上，放疗通常与化疗和靶向治疗结合使用(Goense et al.，2016;Mariette，Piessen，&Triboulet，2007;Ohashi et al.，2015)。然而，即使这样，放射治疗的效果仍然不能让人满意。放疗过程中，普遍存在放射线耐受现象，这也是导致放疗失败的主要原因。因此，提高食管癌的放疗敏感性势在必行。课题组前期研究发现EGFR高表达食管癌患者能从术后放疗中获益，但其机制不明。本研究从细胞和分子水平探讨EGFR信号通路影响食管鳞癌的放射线敏感性的机制。 放射线抑制EGFR下游相关信号通路的活化，并且诱导EGFR的核转位。为研究EGFR信号通路对放射线敏感性的影响，在食管癌细胞系中外源性高表达EGFR。放射线照射后，高表达EGFR的食管鳞癌细胞系克隆形成能力显著低于对照细胞，提示其对于放射线的敏感性增强。同时，构建了核定位序列突变的EGFR高表达质粒，当细胞在放射线处理后，突变型的EGFR蛋白核转位明显较少，其克隆形成能力低于高表达野生型EGFR的食管鳞癌细胞，提示在细胞水平阻止EGFR的核转位可以显著提高细胞对于射线的敏感性。以上结果提示EGFR高表达使得食管鳞癌细胞的放射线敏感性增强。进一步的探究发现，细胞在接受放射线刺激后，Survivin显著升高，而高表达EGFR的细胞接受放射线照射之后，Survivn的上调受到抑制。EGFR高表达不影响Survivin的转录水平，也不影响Survivin的蛋白酶体降解途径，而可能通过某种机制抑制Survivin的合成。提示抑制Survivin上调可能是EGFR高表达的食管鳞癌细胞对放射线更敏感的原因之一。 放射线治疗可以诱导Survivin蛋白表达量升高，因此，采用Survivin的小分子抑制剂YM155处理细胞，结果发现YM155对不同食管鳞癌细胞系的放射线增敏效果不同。进一步研究发现，YM155放射增敏效果的差异不仅仅取决于Survivin的表达水平，更取决于放射线照射是否诱导细胞衰老，对于被诱导衰老的KYSE150等食管鳞癌细胞，其增敏效果明显;相反，对于KYSE180等不被诱导衰老的细胞，其增敏效果不显著。 综上所述，放射线照射能够抑制EGFR信号通路，并且促进EGFR的核转位，但是高表达EGFR的食管鳞癌细胞对于放射线更敏感。EGFR可以抑制放射线诱导的Survivin蛋白高表达，而抑制Survivin仅仅对于放射线诱导衰老的细胞有增敏效果。本研究从细胞水平研究了EGFR信号通路与食管癌放射线敏感性的关系，提出Survivin蛋白的重要作用。并且探索通过抑制Survivin增强放疗敏感性的机制，为增强食管癌放疗敏感性的靶向治疗提供了实验依据。

目录

图表索引

英文缩略词

摘要

综述EGFR核转位机制及其相关生物学功能研究进展

前言

材料与方法

实验结果

1、放射线通过影响EGFR信号通路调控食管癌细胞生长

1．1放射线照射能够抑制EGFR信号通路

1．2高表达EGFR能增强食管癌细胞的放疗敏感性

1．3放射线照射能够诱导EGFR核转位

1．4抑制EGFR核转位能增强食管癌细胞放射线敏感性

2、抑制Survivin增强食管鳞癌细胞的放射线敏感性

2．1高表达EGFR可以抑制放射线诱导的Survivin上调

2．2 YM155能够抑制由放射线照射而引起的Survivin的上调

2．3 YM155的放射线增敏效果在不同的食管癌细胞系中有所不同

2．4放射线诱导食管鳞癌细胞衰老

2．5 YM155抑制细胞衰老，促进细胞凋亡

2．6 YM155不能增强放射线诱导的细胞凋亡

2．7 YM155在裸鼠移植瘤模型中，能增强放射线敏感性

2．8 YM155的放射增敏效果取决于放射线能否诱导细胞衰老

讨论

结论

参考文献

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