声明
英语缩略词
前言
第一部分 NK 细胞介导的细胞毒性与肝癌细胞株 NKG2DLs 表达的相关性
1 材料
1.1 细胞株
1.2 实验仪器和设备
1.3 主要试剂溶液和耗材
1.4 主要试剂溶液配制及保存
2 实验方法
2.1 NK细胞分选
2.2 流式细胞术检测 NK细胞纯度
2.3 细胞复苏
2.4 细胞培养
2.5 细胞冻存
2.6 细胞计数
2.7 RNA提取
2.8 RNA/DNA 浓度和纯度测定
2.9 逆转录合成 cDNA
2.10 PCR引物
2.11 Real-Time PCR
2.12 流式检测细胞膜上蛋白表达
2.13 用荧光素酶基因标记肿瘤细胞
2.14 肝癌细胞和NK细胞共培养
3 结果
3.1 肝癌细胞株总RNA的浓度
3.2 肝癌细胞株NKG2DLs的mRNA 表达情况
3.3 流式细胞术检测NKG2DLs在肝癌细胞系中的蛋白表达水平
3.4 NK细胞对肝癌细胞的细胞毒性
4 讨论
5 小结
第二部分 蛋白酶抑制剂对NKG2DLs 表达的影响
1 材料
1.1 细胞株
1.2 实验仪器和设备
1.3 主要试剂溶液和耗材
2 实验方法
2.1 PCR引物
2.2 Real-Time PCR
2.3 流式检测细胞膜上蛋白表达
2.4 CCK-8法检测药物对肝癌细胞株的IC50值
2.5 金属蛋白酶抑制剂处理肝癌细胞
3 结果
3.1 肝癌细胞系部分蛋白酶的mRNA表达情况
3.2 五种蛋白酶抑制剂的筛选和鉴定
4 讨论
5 小结
第三部分 CUDC-101对肝癌细胞NKG2DLs 表达及增殖的影响
1 材料
2 实验方法
2.1 流式检测细胞膜上蛋白表达
2.2 CCK-8法检测药物对肝癌细胞株的IC50值
3 结果
3.1 CUDC-101在体外影响肝癌细胞系的增殖
3.2 CUDC-101在体外明显上调肝癌细胞NKG2DLs的表达
4 讨论
5 小结
第四部分 CUDC-101增加NK细胞对肝癌细胞的细胞毒性
1 材料
2 方法
3 结果
4 讨论
5 小结
全文总结
问题及展望
参考文献
综述:肝癌免疫微环境对NK细胞功能调节的研究进展
致谢
福建医科大学;
