人干扰素α2b和IgG Fc片段融合蛋白显著延长体内半衰期

摘要

α干扰素(IFNα)是一组能够诱导一系列细胞内蛋白表达，继而发挥抗病毒、抗细胞增殖和调节免疫应答作用的细胞因子。许多重组的天然结构Ⅰ型IFNα以及重组的非天然结构的Ⅰ型干扰素己广泛用于临床，并能有效的治疗多种人类病毒性疾病和肿瘤。作为小分子量蛋白，IFNα从血浆中清除的速度较快，从而导致在临床治疗中需要重复多次用药才能达到治疗效果，半衰期短及用药的频繁已经成为长期使用干扰素治疗的一个主要问题。 目前常用化学修饰和构建融合蛋白的方法来延长IFNα的半衰期。为了延长其在体内的半衰期，本文考虑使用人的IFN-alpha-2b和IgG的Fc片段构建长效干扰素。在本研究中，构建了IFNa2b与人IgG免疫球蛋白Fc片段的融合基因(IFNα2b-Fcγ)并在毕赤酵母中以二聚体形式分泌表达，并有部分糖基化。不同亚型Fcγ片段的融合蛋白对IFNα2b抗病毒活性均有一定影响。其中IFNα2b-Feγ2所受影响最小，较单纯的IFNα2b降低了2.3倍，抗病毒活性可达4.29×10<'7> IU/mg，大鼠皮下注射后循环血液中半衰期达65 h，血液中存留时间120 h以上，比商品重组干扰素的体内半衰期延长约8倍，血液存留时间延长10倍，显示了其良好的临床应用前景

目录

声明

摘要

第一章绪论

第一节干扰素分类及性质

第二节干扰素的转录调节及信号通路

第三节干扰素的生物学作用

第四节干扰素的临床应用

第五节IgG融合蛋白的构建原理

第六节IgG融合蛋白的应用

第二章材料与方法

前言

第一节实验材料

第二节溶液的配制

第三节实验方法

第三章结果与讨论

第一节实验结果

第二节结果讨论

全文小节

参考文献

致谢

攻读学位期间申请的专利及发表的论文

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