烯醇化酶(Eno)及抗体降解蛋白(IdeZ)在马链球菌兽疫亚种抗吞噬过程中的作用

目录

声明

摘要

符号及缩略语说明

第一章烯醇化酶Eno及其研究进展

1 Eno蛋白结构特征

2糖酵解催化作用

3纤溶酶原结合作用

4促进细胞凋亡作用

5疾病过程相关作用

5．1癌症相关

5．2自身免疫疾病相关

5．3其它疾病相关

6其它

第二章抗体降解蛋白及其研究进展

1抗体降解蛋白结构特征

2抗体降解作用

3其它生物学作用

3．1参与免疫逃避

3．2应用于疫苗生产

3．3应用于治疗疾病

第三章SEZ Eno与Raw264．7细胞互作蛋白筛选

1材料与方法

1．1主要材料

1．2细胞稳定同位素标记(SILAC)

1．3rEno融合蛋白的获得

1．4rEno蛋白处理Raw264．7细胞后主要表型变化的检测

1．5质谱检测结果分析

1．6真核表达载体的构建

1．7体外免疫共沉淀鉴定蛋白互作

2结果

2．1细胞稳定同位素标记(SILAC技术)结果

2．2rEno融合蛋白的获得

2．3rEno蛋白处理Raw264．7细胞后主要表型变化的检测结果

2．4质谱检测结果分析

2．5真核表达载体的构建

2．6体外免疫共沉淀鉴定蛋白互作结果

3讨论

参考文献

第四章SEZ Eno与Raw 264．7细胞内Dctn2编码蛋白互作机制

1材料与方法

1．1主要材料

1．2rDctn融合蛋白的获得

1．3制备小鼠抗rDctn蛋白多克隆抗体

1．4检测rEno蛋白处理Raw264．7细胞后Dctn蛋白水平变化

1．5表面等离子共振(Biacore)验证蛋白互作

2结果

2．1rDctn融合蛋白的获得

2．2小鼠rDctn多克隆抗体的制备

2．3Eno蛋白处理Raw264．7细胞后胞内Dctn蛋白水平变化检测

2．4表面等离子共振(Biacore)验证蛋白互作

3讨论

参考文献

第五章SEZ抗体降解蛋白IdeZ生物活性鉴定

1材料与方法

1．1主要材料

1．2引物的设计与合成

1．3pCold-SUMO-IdeZ重组质粒构建

1．4IdeZ蛋白的表达与纯化

1．5重组IdeZ蛋白降解IgG活性的检测

1．6SEZ多克隆抗血清的制备及其IgG的纯化

1．7重组IdeZ蛋白抑制抗体介导的巨噬细胞吞噬SEZ活性检测

2结果

2．1pCold-SUMO-IdeZ原核表达质粒的构建

2．2重组IdeZ蛋白降解IgG活性的检测

2．3重组IdeZ抑制抗体介导的巨噬细胞吞噬SEZ活性的检测

3讨论

参考文献

全文总结

攻读硕士学位期间发表论文与学术交流活动

致谢

附录