K亚群禽白血病病毒细胞受体及受体结合域鉴定

目录

声明

主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 禽白血病病毒病原学

1.1.1 ALV的病毒学特征

1.1.2 ALV的基因组

1.1.3 ALV的分类

1.1.4 ALV的致病机理

1.2 禽白血病病毒流行病学

1.2.1 ALV-J的流行病学

1.2.2 ALV-K的流行病学

1.3 禽白血病病毒侵入机制

1.4 禽白血病病毒各亚群细胞受体研究进展

1.4.1 ALV-A的细胞受体研究进展

1.4.2 ALV-B/D/E的细胞受体研究进展

1.4.3 ALV-C的细胞受体研究进展

1.4.4 ALV-J的细胞受体研究进展

1.4.5 不同亚群ALV的细胞受体拓扑结构比较

1.5 禽白血病病毒各亚群gp85受体结合域研究进展

1.5.1 ALV-A gp85受体结合域研究进展

1.5.2 ALV-B/C gp85受体结合域研究进展

1.6 本研究目的与意义

第二章 K亚群禽白血病病毒细胞受体鉴定

2.1材料

2.1.1病毒

2.1.2 细胞、质粒及引物

2.1.3 主要试剂

2.1.4 实验仪器

2.2 方法

2.2.1 ALV-K gp85真核表达质粒的构建

2.2.2 A、K和J亚群ALV gp85和可溶性Tva蛋白制备

2.2.3 RCAS-K-GFP和RCAS-K-luciferase重组病毒的拯救

2.2.4 Tva蛋白跨膜表达情况检测

2.2.5 A和K亚群ALV gp85交叉干扰实验

2.2.6 ALV-K gp85与sTva蛋白相互作用检测

2.2.7 受体结合实验

2.2.8 可溶性受体阻断实验

2.2.9 受体重建实验

2.3 实验结果

2.3.1 ALV-K gp85真核表达质粒的鉴定

2.3.2 A、K和J亚群ALV gp85和sTva蛋白的表达与纯化

2.3.3 RCAS-K-GFP和RCAS-K-luciferase重组病毒拯救

2.3.4 Tva蛋白跨膜表达

2.3.5 A和K亚群ALV gp85蛋白交叉干扰病毒进入

2.3.6 ALV-K gp85与sTva蛋白相互作用

2.3.7 ALV-K gp85结合跨膜表达的Tva

2.3.8 sTva蛋白阻断RCAS-K-luciferase重组病毒侵入

2.3.9 跨膜表达的Tva介导RCAS-K-GFP重组病毒进入

2.4 讨论

2.5 小结

第三章 K亚群禽白血病病毒gp85上的受体结合域鉴定

3.1 实验材料

3.1.1 质粒、病毒与细胞

3.1.2 主要实验试剂

3.1.3 主要实验仪器

3.2 实验方法

3.2.1 HA替换ALV-K gp85真核表达质粒的构建

3.2.2 HA替换ALV-K gp85蛋白的表达与纯化

3.2.3 ALV-K gp85-HA突变体蛋白二级结构差异检测

3.2.4 ALV-K gp85-HA突变体蛋白与Tva结合力检测

3.2.5 ALV-K gp85-HA突变体蛋白封闭Tva能力检测

3.2.6 不同ALV-K毒株间受体结合域氨基酸序列比对

3.2.7 ALV-K gp85-HA回复突变体真核表达质粒的构建

3.2.8 ALV-K gp85-HA回复突变体蛋白的表达与纯化

3.2.9 ALV-K gp85-HA回复突变体与Tva结合力检测

3.3 实验结果

3.3.1 HA替换ALV-K gp85真核表达质粒的鉴定

3.3.2 HA替换ALV-K gp85蛋白的表达与纯化

3.3.3 ALV-K gp85-HA突变体蛋白二级结构差异检测结果

3.3.3 ALV-K gp85-HA突变体蛋白与Tva结合力检测结果

3.3.4 ALV-K gp85-HA突变体蛋白封闭Tva能力检测结果

3.3.5 不同ALV-K毒株间受体结合域氨基酸序列比对结果

3.3.6 ALV-K gp85-HA回复突变体真核表达质粒的鉴定

3.3.7 ALV-K gp85-HA回复突变体蛋白的表达与纯化

3.3.8 ALV-K gp85-HA回复突变体与Tva结合力检测结果

3.4 讨论

3.5 小结

第四章 全文结论

参考文献

附录A

附录B

致谢

作者简历