声明
论文说明
致谢
摘要
1 引言
2 靶向基因组编辑技术原理
2.1 NHEJ修复途径
2.2 HR修复途径
2.3 其他修复途径
3 CRISPR/Cas系统介导的基因组编辑技术
3.1 CRISPR/Cas系统发展进程
3.2 CRISPR/Cas系统分类
3.3 CRISPR/Cas系统作用机制
3.4 CRISPR/Cas9系统在果蝇基因组编辑中的应用
3.5 CRISPR/Cas9系统的优势和局限
4 果蝇章鱼胺受体的研究
4.1 引言
4.2 章鱼胺受体的信号转导途径
4.3 果蝇章鱼胺受体的研究进展
5 展望
第二章 利用CRISPR/Cas9技术敲除果蝇white基因
1 引言
2 材料与方法
2.1 供试昆虫
2.2 主要质粒和菌株
2.3 主要试剂和仪器
2.4 CRISPR/Cas9靶位点的选择
2.5 Cas9 mRNA的制备
2.6 gRNA的制备
2.7 pDCC6-W1,pDCC6-W2载体制备
2.8 注射样品的配制
2.9 果蝇胚胎的显微注射
2.1 0 突变检测
3 结果与分析
3.1 white基因序列分析和靶位点选择
3.2 Cas9 mRNA和gRNA的制备
3.3 pDCC6-W1;pDCC6-W2载体制备
3.4 G1代突交检测
4 讨论
第三章 利用tRNA-gRNA技术实现多位点打靶CG18208基因
1 引言
2 材料与方法
2.1 供试昆虫
2.2 CG18208基因靶位点选
2.3 Donor质粒制备
2.4 pCFD5-OA3质粒制备
2.5 果蝇胚胎显徼注射
2.6 CG18208突变检测
3 结果与分析
3.2 pCFD5-OA3载体制备
3.3 G0代果蝇突变检
3.4 HRMA分析结果
4 讨论
1 本研究的创新之处
2 本研究存在的问题
3 今后的研究方向
参考文献
浙江大学;
果蝇; 基因组编辑; CRISPR/Cas9技术; white基因; CG18208基因; 章鱼胺受体; tRNA-gRNA技术;