人心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒的方法学评价及在ACS患者早期危险分层和预后评估中的临床研究

摘要

第一部分：
　　目的:
　　评价兰州生物制品研究所研发的人心脏型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)ELISA检测试剂盒与已批准上市的同类试剂盒用于临床诊断检测性能的等效性及临床符合性,确定其性能的可接受性。
　　方法:
　　样本为中国人民解放军总医院住院的疑诊ACS患者与解放军305医院健康查体人员的血浆或血清,根据入选标准和排除标准共入选240例样本,对兰州与荷兰H-FABP试剂盒采用平行、对照试验标准检测,进行方法比较实验,评价两者相关性,以及对兰州H-FABP试剂盒检测H-FABP的精密度试验、回收试验、干扰试验和稳定性试验来评价其临床检测性能。数据统计学描述与分析应用SPSS13.0软件包进行,两种试验产品结果的一致性采用Kappa检验和相关分析,采用双侧检验,认为P<0.05为差异有统计学意义。
　　结果:
　　方法比较实验:在可检测范围内,兰州与荷兰试剂盒全自动免疫分析仪测定检测H-FABP值的相关系数R=0.96,P<0.001,两者具有良好的相关性。精密度试验:兰州试剂盒检测H-FABP的批内变异系数为5.7％~8.2%,批间变异系数为3.9%~4.1%。回收试验:兰州试剂盒检测H-FABP的回收率为93.0%-105.7%。干扰试验:不同浓度TBIL对正常水平的H-FABP的影响度在-9.57%~2.39%;不同浓度TBIL对异常水平的H-FABP的影响度在-20.71~7.43%。不同浓度TG对正常水平的H-FABP的影响度在-7.33%~10.13%;不同浓度TG对异常水平的H-FABP的影响度在5.07~10.93%。不同浓度溶血血红蛋白对正常水平的H-FABP的影响度在-9.18%~8.16%;不同浓度溶血血红蛋白对异常水平的H-FABP的影响度在-9.27%~9.83%。兰州试剂盒检测H-FABP诊断ACS的灵敏度为91.8%,特异度为88.7%,正确率为90.4%。荷兰试剂盒检测H-FABP诊断ACS的灵敏度为90.3%,特异度为86.8%,正确率为88.8%。采用配对资料McNamara’s test卡方检验,结果显示两种产品测定结果在统计学上无差异(P=0.668,>0.05)。采用Kappa检验,结果显示两种产品的测定结果的一致性很好(Kappa=0.726,P<0.01)。
　　结论:
　　1、兰州生物研究所生产的H-FABP与荷兰HBT公司生产的H-FABP检测试剂盒比较,具有良好的相关性;
　　2、在本实验人群中,兰州H-FABP试剂盒诊断ACS的灵敏度、特异度和正确率略高于同类上市产品荷兰HBT公司生产的H-FABP试剂盒。两组试剂盒诊断ACS的灵敏度、特异度和正确率未显示统计学差异,两者比较具有等效性且临床符合性良好;
　　3、兰州生物研究所生产的H-FABP检测试剂盒的临床检测性能指标良好,在临床上具有推广应用的潜在价值。
　　第二部分：
　　目的：
　　探讨自主研发的H-FABP试剂盒检测ACS患者H-FABP水平,并联合检测NT-proBNP、CRP、cTnT等心脏标志物,评价其与ACS患者发生心血管不良事件之间的关系,探讨联合检测心脏标志物在ACS患者危险分层及预后评估中的应用价值。
　　方法：
　　2010年3月-2012年3月就诊于解放军总医院的疑诊ACS患者286例,筛选232例明确诊断急性冠脉综合症(ACS)者,包括不稳定型心绞痛(UA)、非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)以及ST段抬高心肌梗死(STEMI);临床治疗及随访资料完整;排除原有肾功能不全、心功能不全、慢性阻塞性肺部疾病以及原有各种结缔组织疾病、感染、外伤、恶性肿瘤患者。胸痛发作至住院12小时内检测ACS患者H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT水平,根据四分位数进行分组,利用受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC曲线),对H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT四种标志物在ACS预后评估中的价值进行系列比较,并对四种标志物联合评价方案在ACS预后及危险分层中的价值进行初步探讨和分析。
　　结果：
　　H-FABP在ACS患者中的平均水平为20.98±11.39ng/ml,其预测心血管事件的ROC曲线下面积为0.807,其判断界值为40.97ng/ml。NT-proBNP、CRP和cTnT的ROC曲线下面积稍低,但均大于0.7,因此对ACS患者心血管事件的发生均有较好的预测作用。随访12月时伴有心血管事件患者的四种标志物检测水平均明显高于无心血管事件组患者。根据四分位值将四种标志物检测值由低到高分为四组,结果发现各标志物高值组患者心血管事件的发生率均显著高于低值组患者,相应其无心血管事件生存率亦明显低于低值组。COX单因素分析显示四种心脏标志物均与ACS患者心血管事件的发生明显相关。以四种标志物各自的截断值作为阳性判断标准进行分组,显示四种标志物都阳性共有16例,均出现心血管事件,当H-FABP阳性且其他有两项标志物阳性时,有62.5%的患者随访可出现心血管事件。当H-FABP阳性且其他有一项标志物阳性时,其心血管事件的发生率有所下降,但仍在30%以上。当仅H-FABP阳性时,心血管事件的发生率为23.1%,仍明显高于四项标志物均阴性组,后者心血管事件发生率仅为4.6%。进一步以年龄、性别、高血压、吸烟、糖尿病、病变血管数及H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT四种标志物为自变量,以将随访12个月时心血管不良事件为因变量,进行Cox多因素回归分析,结果显示,H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT为ACS患者出现心血管不良事件的独立危险因素。
　　结论：
　　1、H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT的检测水平与ACS患者心血管事件的发生密切相关,是ACS患者预后的独立影响因素。
　　2、国产试剂盒检测H-FABP并联合NT-proBNP、CRP和cTnT检测可更好地对ACS患者进行早期危险分层,并对预后评估有很好的预测价值。
　　第三部分：
　　目的：
　　探讨H-FABP在发病早期cTnT阴性的ACS患者的危险分层及预后评估中的应用价值。
　　方法：
　　2010年3月-2012年3月就诊于解放军总医院并明确诊断急性冠脉综合症(ACS)患者,共232例,筛选胸痛发作至入院6小时内检测cTnT为阴性患者55例,同时检测H-FABP水平。并在发病后12、24、48小时内动态连续检测H-FABP与cTnT水平,观察H-FABP与cTnT检测值的动态变化及相应患者病情演变,并绘制H-FABP预测发病早期cTnT阴性的ACS患者演变为心肌梗死的ROC曲线,计算曲线下面积,评价H-FABP预测发病早期cTnT阴性患者演变为心肌梗死的特异度与灵敏度。对发病早期cTnT阴性的ACS患者随访观察12个月,根据此间是否出现心血管事件分为2组,观察2组患者在发病早期H-FABP检测水平是否存在差异。采用ROC曲线观察发病6小时内H-FABP检测水平预测发病早期cTnT阴性的ACS患者心血管事件的曲线面积,并根据ROC曲线选择H-FABP值合适的截断点,据此分为H-FABP高值组与低值组,观察2组患者心血管事件发生情况及无心血管事件生存率的差异。
　　结果：
　　出现症状6小时内检测cTnT为阴性的ACS患者,随病情进展cTnT可逐渐增高,在出现症状后12小时检测时达峰值,随后开始下降,但仍能维持一定水平,在48小时可下降约50%。而H-FABP在出现症状6小时内即达峰值,12小时轻度下降(12.82%),随后下降较快,48小时可下降约79%。55例患者有24例在住院期间演变急性心肌梗死,而出现症状6小时内检测的H-FABP水平对发病早期cTnT阴性的ACS患者演变为心肌梗死具有很好的预测价值,其ROC曲线下面积为0.946,截断值为15.47ng/ml,预测的灵敏度为87.5%,特异度为90.33%。在随访12个月时进行观察,发现有11例患者出现心血管事件,发生心血管事件组患者的H-FABP均值明显高于无心血管事件组。用ROC曲线分析显示曲线下面积为0.772,其预测心血管事件的截断值为44.71ng/ml。我们以该截断值为标准,将其分为高值组与低值组,结果显示在高值组即高危组患者心血管事件的发生率为54.5%,而在低值组即低危组患者心血管事件的发生率仅为11.4%,二者差异显著。高危组患者无心血管事件生存率明显低于低危组(8.55±1.08VS11.23±1.39)。
　　结论：
　　对于发病早期cTnT检测阴性的ACS患者,H-FABP是危险分层与预后评估的良好指标。

目录

封面

声明

目录

第一部分人心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒的方法学评价

中文摘要

英文摘要

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

第二部分H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT联合检测对ACS患者预后评估的临床研究

中文摘要

英文摘要

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

第三部分H-FABP对发病早期cTnT阴性的ACS患者危险分层及预后评估的临床研究

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

综述一

综述二

英文缩略词表

攻读学位期间承担科研课题、受表彰和撰写论文情况

致谢

附录：病例观察表