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Contents
中 文 摘 要
ABSTRACT
二、Cloning and expression profiling of Cytochrome P
第一章 文献综述
1.1飞蝗简介
1.2玉米螟简介
1.3细胞色素P450概述
1.3.1內源代谢
1.3.2外源代谢
1.4细胞色素P450还原酶及其研究进展
1.5杀虫剂与植物次生代谢物
1.6 研究目的和意义
第二章 玉米螟转录组分析
2.1实验原始数据、实验材料和方法
2.1.1实验原始数据来源
2.1.2转录组测序文库评估
2.1.3转录组测序数据组装
2.1.4 Unigene功能注释
2.1.5基因表达量分析
2.1.8饲喂法处理，干扰亚洲玉米螟P450基因
2.2实验结果
2.2.1测序文库评估
2.2.2原始数据质量评估
2.2.4 Unigene功能注释
2.2.5 表达定量分析
2.2.6亚洲玉米螟的全长P450基因
2.2.7饲喂法处理亚洲玉米螟
2.3讨论
第三章 亚洲玉米螟细胞色素P450还原酶基因的克隆与表达分析
3.1实验材料和试剂
3.1.1供试昆虫
3.1.2主要试剂盒仪器设备
3.1.3亚洲玉米螟细胞色素P450还原酶全长的克隆
3.1.4序列分析
3.1.5 cDNA模板制备
3.1.6实时定量PCR检测
3.2实验结果与分析
3.2.1亚洲玉米螟OfCPR基因的克隆
3.2.2亚洲玉米螟OfCPR氨基酸序列分析
3.2.3 OfCPR蛋白多序列对比与进化分析
3.2.4 OfCPR基因差异表达分析
3.3讨论
第四章 干扰飞蝗细胞色素P450还原酶基因/细胞色素P450基因影响飞蝗对西维因的敏感性
4.1实验材料和方法
4.1.1供试昆虫
4.1.2相关试剂及仪器
4.1.3 cDNA的合成和LmCPR的克隆
4.1.4 LmCPR基因的生物信息学分析
4.1.5实时定量PCR检测
4.1.6 RNAi技术干扰LmCPR
4.1.7 CPR酶活力检测
4.1.8西维因检测
4.1.9 CYP450基因的引物设计
4.1.10 PBO处理飞蝗三龄若虫，CYP450酶活力测定
4.2实验结果
4.2.1 LmCPR基因的克隆与序列分析
4.2.2 昆虫CPRs间的进化分析
4.2.3 LmCPR基因的表达分析
B LmCPR在不同龄期相对表达量；N1、N2、N3、N4和N5分别表示一至五龄幼虫期；EG：卵期；
4.2.4 RNAi技术沉默LmCPR基因
4.2.5沉默LmCPR基因后对西维因敏感性分析
4.2.6 P450基因特征
4.2.7 P450基因差异表达分析
4.2.8 PBO处理后影响飞蝗对西维因的敏感性
4.2.9用西维因分别处理沉默Lm6HN1，Lm6HL1，Lm6HC1和Lm6HQ1的飞蝗
4.2.9不同浓度西维因对Lm6HN1，Lm6HL1，Lm6HC1和Lm6HQ1四个基因的诱导表达
4.3讨论
第五章 花椒毒素对飞蝗CYP450的诱导及其解毒机制研究
5.1实验材料和方法
5.1.1供试昆虫
5.1.2相关试剂
5.1.3CYP450基因和转录因子的引物设计
5.2实验结果
5.2.1不同浓度花椒毒素对飞蝗P450的诱导表达
5.2.2 Lm6FE1，Lm6HL1和Lm6FD1的解毒功能研究
5.2.3 生理条件下，转录因子调控CYP450基因的表达
5.2.4花椒毒素诱导下，转录因子CncC和Maf调控CYP6FE1、CYP6FD1和CYP6HL1
5.2.5沉默转录因子CncC和Maf，飞蝗对花椒毒素的敏感性
5.3讨论
参考文献
[38] Zhang T T, He K L, Wang Z Y. Transcriptome Co
攻读学位期间取得的研究成果
致 谢
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