声明
摘要
缩略词
第一章 绪论
1.1 酶催化的温度依赖性
1.1.1 蛋白质稳定性的热动力学基础
1.1.2 蛋白质稳定性的关键影响因素
1.1.3 温度与酶活性
1.2 酶与底物的相互作用
1.2.1 “锁钥”学说
1.2.2 诱导契合理论
1.2.3 构象选择理论
1.2.4 蛋白质配体结合机制
1.3 蛋白质动态与功能
1.3.1 Loop结构的动态与功能
1.3.2 蛋白质结构域交界面的动态与动能
1.3.3 酶活性中心氨基酸残基的动态与功能
1.4 分子动力学模拟
1.4.1 分子动力学模拟的特点与应用范围
1.4.2 分子动力学模拟的不同应用场景
1.5 立题依据
第二章 GH12家族纤维素酶热稳定机制的分子动力学模拟
2.1 研究背景
2.2 系统与方法
2.2.1 模拟体系的准备
2.2.2 分子动力学模拟参数设置
2.2.3 数据分析
2.2.4 生物信息分析
2.3 结果与讨论
2.3.1 GH12家族纤维素酶的去折叠与结构稳定性
2.3.2 GH12家族纤维素酶热敏感区域的鉴定
2.3.3 GH12家族纤维素酶N末端内部相互作用
2.3.4 末端氨基酸序列分析
2.4 本章小结
第三章 分子动力学模拟研究GH12家族纤维素酶热失活机制
3.1 研究背景
3.2 系统与方法
3.2.1 模拟体系的准备
3.2.2 分子动力学模拟参数设置
3.2.3 主成分分析
3.2.4 相互作用网络分析
3.3 结果与讨论
3.3.1 酶分子的结构完整性
3.3.2 热敏感区的定位
3.3.3 高温下酶活性中心的动态扰动
3.3.5 氨基酸残基相互作用网络分析
3.3.6 酶分子设计的新规则
3.4 本章小结
第四章 底物结合过程中酶活性中心构象动态的分子动力学研究
4.1 研究背景
4.2 系统与方法
4.2.1 模拟体系的准备
4.2.2 分子动力学模拟参数设置
4.2.3 主成分分析
4.2.4 活性中心氨基酸残基侧链二面角分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 TfCel5A活性中心的协同运动
4.3.2 活性中心氨基酸残基侧链二面角动态
4.3.3 TfCel5A活性中心外的结构柔性分析
4.3.4 构象选择与构象恢复
4.4 本章小结
第五章 纤维素酶催化反应过渡态构象的稳定机制探究
5.1 研究背景
5.2 材料与方法
5.2.1 模拟体系的准备
5.2.2 分子动力学模拟参数设置
5.2.3 氢键、相互作用能与二面角分析
5.2.4 TrCel7B及其突变体的克隆、表达和纯化
5.2.5 酶催化动力学参数的测定
5.2.6 纤维素酶催化产物谱分析
5.3 结果与讨论
5.3.1 TrCel7B活性中心不均匀分布
5.3.2 酶与底物的相互作用能
5.3.3 虚拟突变与糖环构象
5.3.4 定点突变对酶催化产物谱的影响
5.3.5 GH7家族纤维素酶的多结构比对
5.4 本章小结
第六章 重要糖苷水解酶家族酶活性中心构象动态的演化分析
6.1 研究背景
6.2 系统与方法
6.2.1 模拟体系的准备
6.2.2 分子动力学模拟参数设置
6.2.3 氨基酸残基侧链二面角分析
6.3 结果与讨论
6.3.1 活性中心构象水平上的动态异质性
6.3.2 活性中心不同位点上的构象动态偏好性
6.3.3 活性中心不同动态集合功能与演化分析
6.3.4 其它糖苷水解酶家族酶活性中心的构象动态分析
6.4 本章小结
全文总结与展望
参考文献
附录
致谢
攻读学位期间发表的学术论文