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马来西亚无刺蜂Heterotrigona itama蜂胶中萜类成分的优化提取、定量及生物活性检测

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目录

论文说明

摘要

英文缩略表

第一章综述

1.1无刺蜂及无刺蜂蜂胶概述

1.2蜂胶的提取方法

1.2.1溶剂浸提法

1.2.2超临界流体萃取法

1.2.3超声波辅助萃取法

1.2.4微波辅助提取法

1.2.5超高压辅助提取法

1.3.1总黄酮类

1.3.2总酚酸类

1.3.3萜类

1.3.4甾醇类

1.3.5氧杂蒽酮类

1.3.6其它

1.4无刺蜂蜂胶的生物活性

1.4.1抗氧化活性

1.4.2抑菌活性

1.4.3抗肿瘤、抗增殖活性

1.4.4抗炎活性

1.5选题目的与研究意义

1.6本实验主要研究内容

1.7实验技术路线

第二章马来西亚无刺蜂H.itama蜂胶中萜类成分的优化提取

2.1仪器与试剂

2.1.1仪器与设备

2.1.2实验试剂

2.2方法

2.2.1样品收集与处理

2.2.2萜类成分检测及标准曲线的建立

2.3单因素实验

2.3.1不同溶剂对萜类成分提取得率的影响

2.3.2不同浓度乙醇对萜类成分提取得率的影响

2.3.3不同体积料液比对萜类成分提取得率的影响

2.3.4不同提取时间对萜类成分提取得率的影响

2.3.5不同提取次数对萜类成分提取得率的影响

2.4响应面优化实验

2.5结果与分析

2.5.1不同溶剂的单因素实验结果

2.5.2不同浓度乙醇的单因素实验结果

2.5.3不同料液比的单因素实验结果

2.5.4无刺蜂H.itama蜂胶最佳浸提时间的选择

2.5.5最佳浸提次数的选择

2.5.6优化实验结果

2.6讨论

2.7小结

第三章马来西亚无刺蜂H.itama无刺蜂蜂胶萜类成分优化提取物的主要萜类成分分析

3.1仪器与试剂

3.1.1仪器与设备

3.1.2材料与试剂

3.2实验方法

3.2.1样品处理

3.2.2标准溶液制备

3.2.3液相色谱条件

3.2.4质谱条件

3.3结果与分析

3.3.2无刺蜂H.itama蜂胶萜类优化提取物的LC-MS/MS提取离子色谱图以及标准品或制备纯品的LC-MS/MS总离子流程图

3.3.3无刺蜂H.itama蜂胶萜类优化提取物中五种萜类化合物定量

3.4讨论

3.5小结

第四章马来西亚无刺蜂H.itama蜂胶萜类优化提取物的抗氧化及抗炎活性研究

4.1材料与仪器

4.1.1材料与试剂

4.1.2仪器与设备

4.2实验方法

4.2.1 DPPH自由基清除能力测定

4.2.2 ABTS自由基清除能力测定

4.3小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞抗炎活性实验

4.3.1 RAW264.7细胞培养及样品毒性浓度测定

4.3.2利用Griess法测定RAW 264.7细胞培养液中的NO浓度

4.3.3细胞RNA提取、cDNA和荧光定量PCR

4.4结果与分析

4.4.2 H.itama蜂胶优化提取物对RAW 264.7细胞存活率的影响

4.4.3 Griess法测定RAW 264.7细胞培养液中的NO浓度

4.4.4基因mRNA相对水平表达

4.5讨论

4.6小结

第五章总结与展望

5.1主要结论

5.2创新点

5.3不足之处及研究展望

参考文献

致谢

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