Nrf2、γ-GCS表达在苦参碱干预博来霉素诱导大鼠肺纤维化中的作用

摘要

目的:
　　研究苦参碱在博莱霉素诱导的实验性大鼠肺纤维化治疗中的作用。检测肺组织中Nrf2及γ-GCS的表达,探讨其可能的作用机制。
　　方法:
　　将120只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、实验模型组(B组)、泼尼松组(C组)、苦参碱50mg组(D组)、苦参碱200mg组(E组)。B、C、D、E组使用博来霉素(5mg/kg)气管注射法复制肺纤维化大鼠模型。A组及B组经胃管注入生理盐水2ml,1次/d;C组经胃管注入醋酸泼尼松0.56mg/Kg,1次/d;D组和E组分别经胃管注入苦参碱50、200mg/kg,1次/d。在给予实验药物后第7d、14d、28d每组各随机处死大鼠8只,取右上叶肺组织石蜡切片 HE染色及Masson胶原染色,并计算肺泡炎及肺纤维化积分;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;RT-PCR法检测肺组织Nrf2mRNA、γ-GCSmRNA的表达;western blot法检测肺组织γ-GCS及Nrf2蛋白的表达。
　　结果:
　　(1)实验模型组表现有程度不等的肺泡炎及明显纤维化。各治疗组肺泡炎及肺纤维化程度减轻,与模型组相比差异显著,大剂量苦参碱组其肺泡炎及肺纤维化程度减轻更显著(P<0.05)。
　　(2)肺组织中羟脯氨酸含量: B、C、D、E组均高于A组(P<0.01),C、D、E组低于B组(P<0.01);不同时间段比较,第28d最高(P<0.01)。
　　(3)肺组织中γ-GCS mRNA、Nrf2 mRNA表达: B、C、D、E组高于A组(P<0.05);C、D、E组高于B组;且表达有随时间下降趋势,以7d较高,第28d较低,但仍高于对照组(P<0.01)。
　　(4)肺组织中γ-GCS、Nrf2蛋白表达:B、C、D、E组高于A组(P<0.05);C、D、E组高于B组;且有随时间下降趋势,以7d较高,第28d较低,但仍高于对照组(P<0.05)。
　　(5)肺组织中γ-GCS的表达与Nrf2的表达呈正相关。
　　结论:
　　1.苦参碱可抑制博来霉素诱导的大鼠肺纤维化;
　　2.苦参碱抑制肺纤维化的可能机制是:苦参碱通过调控 Nrf2的表达,间接调控内源性抗氧化酶γ-GCS,从而抑制肺泡炎和肺纤维化的形成。

目录

封面

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主要缩略语

中文摘要

英文摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

3 结果获取

4 统计学分析

结果

1 SD大鼠肺纤维化模型肺部的病理学变化

2 羟脯氨酸含量

3 肺组织中γ-GCSmRNA、Nrf2mRNA的表达

4 肺组织中γ-GCS 、Nrf2蛋白的表达

5 Nrf2表达与γ-GCS表达相关性分析

讨论

1 肺纤维化大鼠肺组织病理学评价

2 Nrf2、γ-GCS的表达与肺纤维化

3 细胞外基质与肺纤维化

4 苦参碱抗肺纤维化的作用机制

结论

参考文献

硕士期间撰写论文

综述

致谢