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大气压低温等离子体对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的治疗研究

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英文缩略词表

绪论

1.1 银屑病概述

1.1.1 角质形成细胞(KC)在银屑病发病中的作用

1.1.2 氧化应激在银屑病发病中的作用

1.1.3 银屑病的治疗现状

1.2 等离子体概述

1.2.1 大气压低温等离子体(CAP)

1.2.2 CAP的活性物质

1.3 低温等离子体在皮肤科中的应用

1.4 低温等离子体用于治疗银屑病

1.4.1 CAP抑制KC增殖在银屑病中的治疗作用

1.4.2 CAP通过免疫调节在银屑病中的治疗作用

第二部分:大气压低温等离子体抑制HaCaT细胞增殖

2.1 材料、试剂和仪器

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验试剂

2.1.3 实验仪器

2.2 实验方法

2.2.1 CAP实验装置

2.2.2 PAM制备

2.2.3 PAM检测

2.2.4 细胞培养

2.2.5 PAM处理细胞

2.2.6TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-End Labeling)法检测细胞凋亡

2.2.7 CCK-8法检测细胞活性

2.2.8 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡

2.2.9 细胞内ROS检测

2.2.10 实验数据分析

2.3 实验结果

2.3.1 等离子体射流的产生和发射光谱分析

2.3.2 APPJ处理对培养基pH值的影响

2.3.3 PAM的总RONS、1O2、OH、H2O2和NO的检测

2.3.4 PAM诱导HaCaT细胞形态变化

2.3.5 PAM抑制HaCaT细胞增殖

2.3.6 PAM诱导HaCaT细胞凋亡

2.3.7 PAM诱导HaCaT细胞内ROS积累

2.4 讨论

第三部分:大气压低温等离子体对LPS/TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖的影响

3.1 材料、试剂和仪器

3.1.1 实验材料

3.1.2 实验试剂

3.1.3 实验仪器

3.2 实验步骤

3.2.1 LPS、TNF-α、DPI溶液配制

3.2.2 TNF-α、LPS诱导的HaCaT细胞内ROS检测

3.2.3 BCA法蛋白定量

3.2.4 细胞内SOD检测

3.2.5 细胞内GSH检测

3.2.6 CFSE染色

3.2.7 共培养体系建立

3.3 实验结果

3.3.1 PAM对LPS/TNF-α诱导后的HaCaT细胞增殖的影响

3.3.2 PAM对LPS/TNF-α诱导后的HaCaT细胞凋亡的影响

3.3.3 LPS/TNF-α诱导HaCaT细胞可引起细胞内NADPH氧化酶依赖性ROS升高以及细胞内SOD酶活性和GSH含量下降

3.3.4 PAM对经LPS/TNF-α诱导后的HaCaT细胞内的ROS水平的影响

2.4 讨论

第四部分:大气压低温等离子体改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损

4.1 材料、试剂和与仪器

4.1.1 实验材料

4.1.2 实验试剂

4.1.3 实验仪器

4.2 实验方法

4.2.1 动物分组与处理方法

4.2.2 银屑病样皮损面积和严重程度评分(PASI评分)

4.2.3 组织固定与石蜡包埋切片

4.2.4 HE染色

4.2.5 免疫组化(IHC)染色

4.2.6 免疫荧光染色

4.2.7 表皮厚度的计算

4.2.8 切片中Ki67、CD3阳性细胞计数

4.2.9 免疫组化切片IOD

4.3 实验结果

4.3.1 APPJ对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的影响

4.3.2 APPJ对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损组织学的影响

4.3.3 APPJ对皮损处KC的增殖的影响

4.3.4 APPJ对皮损T细胞浸润及血管新生的影响

4.3.5 APPJ对皮损中促炎因子TNF-α、IL-17、IL-22表达的影响

3.4 讨论

参考文献

综述:大气压低温等离子体在医学中的应用

攻读学位期间发表的论文情况

致谢

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