金属离子Cu2+、Fe3+对水凝胶RADA16-NBD培养下成骨细胞生长和分化的相关影响

摘要

目的:本实验选用两种金属离子Cu2+和Fe3+，将其添加在水凝胶RADA16-NBD三维培养的成骨细胞MC3T3-E1中干预培养，通过相应的检测方法，观察及对比二者对成骨细胞增殖及成骨细胞分化等相关方面的影响。为后续机制研究及相应动物实验奠定基础。
　　方法:将购买的 MC3T3-E1成骨细胞接种于 RADA16-NBD水凝胶上进行体外三维培养。分3组进行实验：对照组 A、实验组 B（Cu2+）及实验组 C（Fe3+）。培养24，48，72 h，CCK-8法检测细胞增殖；培养1,3,5 d，ALP试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性；诱导培养21 d时，观察细胞钙化结节情况；Transwill小室培养24 h，观察细胞迁移能力变化。
　　结果：与对照组相比，实验组成骨细胞增殖能力、碱性磷酸酶活性、矿化基质沉积及细胞迁移能力的表达不同程度增高，且实验组 B(Cu2+)效果优于实验组 C(Fe3+)，差异具有统计学意义。
　　结论：Cu2+和Fe3+均可促进MC3T3-E1成骨细胞的增殖、分化及迁移，Cu2+效果要优于Fe3+。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

前言

文献综述

一、体外细胞培养技术二维到三维的发展

二、组织工程学及细胞三维水凝胶支架

三、水凝胶RADA16-NBD的自组装

四、关于成骨细胞与金属离子的阐述

材料与方法

一、实验材料

二、试验方法

结果

1、CCK-8法细胞增殖效应检测

2、ALP检测细胞碱性磷酸酶活性及诱导矿化结节分析

3、Transwill小室检测细胞迁移能力

讨论

结论

参考文献

致谢

英文缩写

攻读学位期间发表的学术成果

附图