血浆中纳曲酮缓释制剂的LC/MS/MS测定及药动学研究

摘要

纳曲酮(Naltrexone，NTX)作为一种非常有前途的阿片受体拮抗剂，在临床上主要用于预防阿片类依赖者脱瘾后复吸的辅助治疗。本研究对NTX皮下植入缓释制剂建立了液相色谱—串联质谱(LC/MS/MS)分析法，并测定生物样品中NTX及其活性代谢物纳曲醇(Naltrexol，NOL)的浓度，在此基础上进行了兔及人体内的药动学研究。 首先，本实验建立了快速、灵敏、专属的LC/MS/MS法，测定动物(家兔)和人血浆中NTX和NOL的浓度。以NTX结构类似物纳络酮(Naloxone，NLX)为内标，200μL血浆样品经液-液萃取后，以乙睛-水-甲酸(40∶60∶1，v/v/v)为流动相，采用PhenomenexGemini-C18柱进行分离，通过LC/MS/MS以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z342+→324+(NTX)，m/z344+→326+(NOL)，m/z328+→310+(IS，NLX)。NTX和NOL的线性范围分别为0.54～135ng·mL-1和0.448～112ng·mL-1，样品测试时间为1.3min。样品预处理的回收率大于80％，日内、日间精密度(RSD)以及冻融稳定性均小于15％，准确度(RE)在±3％范围内。 其次，本实验模拟体内环境，考察了NTX缓释制剂的体外释放行为。结果表明，该缓释制剂释放平稳，释放速率为0.76mg·day-1，平稳释放150天以上，为动物实验给药剂量提供了参考。 第三，本实验进行了动物(家兔)体内的组织相容性及安全性研究。将不同剂量的NTX缓释制剂放置于动物身体的不同部位，观察不同时间动物的体重、体温变化，以及植入部位伤口的变化和组织生理改变，并以LC/MS/MS方法测定相应时间动物体内的血药浓度，以研究NTX缓释制剂的组织相容性和安全性。结果表明，NTX缓释制剂在实验动物(家兔)体内的组织相容性良好；植入120mg，180mg，360mg三个剂量组后，动物体内NTX浓度在3.67ng·mL-1～34.45ng·mL-1，在此药物浓度范围内，并不引起动物明显的不良反应，虽然组织反应程度略有差异，但符合一般生物相容性材料所引起的组织反应过程。 最后，本实验进行了NTX缓释制剂在人体内的药动学研究。应用LC/MS/MS方法测定了人血浆中的NTX及其活性代谢物NOL的浓度，用Winnonlin药动学软件进行了人体内的药动学模型分析。结果表明，植入2220mg，3240mg两个剂量组后，以非房室离散数据模型计算得出Ke值分别为0.0032和0.0038。将单个病人的血药波动与口服给药血药波动进行对比发现，该缓释制剂血药波动小于常规口服制剂给药，且平稳释放期在200天以上。 本研究表明，NTX皮下植入剂具有较好的组织相容性和安全性，其在患者体内可缓慢释放，血药浓度平稳，该结果对后续相关研究可提供方法学参考。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写词表

第一章 前言

第二章 LC/MS/MS定量分析方法的建立

第三章 纳曲酮缓释制剂的体外释放度研究

第四章 纳曲酮在动物体内的组织相容性、安全性和药动学研究

第五章 纳曲酮植入剂在人体内的药动学研究

第六章 结论与讨论

附录

参考文献

致谢