改良后的聚酰胺人工毛发纤维的组织相容性及远期脱落率的实验研究

摘要

毛发相对于人的五官来说有着非常重要的美学价值。健康的头发能够提升一个人的自信与魅力。脱发作为一种临床常见毛发病，虽不属严重疾病，但却对人们的精神、心理产生较大的影响。因此，人们对秃发的诊治要求日益迫切，现代医学也越来越重视对脱发的研究。目前临床上常见的脱发类型包括雄激素性脱发、瘢痕性脱发、先天性脱发及斑秃。对于小面积的脱发患者来说，单位毛囊显微移植术是最常应用的治疗方法，采用该项技术可实现毛囊在秃发区域的重新再分布，并能基本达到一个较为理想的远期术后外观。因此在近年来被广泛应用于头发、眉毛、胡须甚至是阴毛的修复。但无论是哪一种修复技术的采用，都是以患者自体拥有充足的供区毛发为前提，其毛发来源相对有限，对于大面积脱发患者甚至是全秃患者来说，该技术存在供区不足的隐患。同时，供区遗留永久性瘢痕、移植成活率不稳定等问题也明显影响该项技术的远期效果。许多秃发患者头发的丢失是进行性的，毛发修复也无法逆转或是其停止，更无法预测去发展情况。所以，如何提供更多毛发来源成为现今毛发修复外科较难解决的问题。毛囊组织工程近年来就此问题进行了深入的探讨和研究并取得了一定进展，已经通过将鼠源和人源毛囊细胞重建出毛囊，但经传代培养后的毛乳头细胞和毛囊干细胞活性下降，难以获得具有高活性的细胞。但其研究仍然属实验室研究阶段，并未能真正投入临床工作中。在此背景下出现的人工毛发移植为这些问题的解决带来了希望。
　　 为解决上述供区严重不足患者的临床需求，国内外学者对人工毛发进行了积极地探索和研究。1976年首先由日本学者提出了人工毛发移植这一概念。但是最初的人工毛发是由工业上使用的聚酯纤维、聚丙烯酸、人造纤维或是加工过的人体毛发，为了使人工毛发更加逼真，还需对其进行染色。而这些化工原料本身和染色剂均对人体有着较大的毒副作用从而导致人体产生排异反应。几乎所有的移植物均在10周内脱落，甚至还伴随包括持续存在的面部浮肿，蜂窝织炎、头皮硬结、永久性瘢痕和持续性的头发自然脱落在内的严重的毒副作用和永久性后遗症。但由于其具备操作简单、不受供区限制、术后外观良好等优势，研究者一直未放弃对人工毛发的改进。1996年意大利学者提出了一种boifiber合成纤维(聚酰胺人工毛发纤维)。随后陆续有国外学者将这种纤维在临床应用于修复秃发，结果显示其组织相容性良好，可考虑将其用于大面积秃发的修复。但通过长期临床观察和回访发现，该聚酰胺人工毛发纤维的年脱落率约为20-25％，患者需定期进行补种。这就给广大患者的生活带来了极大不便，因此依然无法确实地满足患者的需求。我科实验室自2005年起开始自主研发毛囊单位样结构可移植假发(聚丙烯人工毛发)，经过两代的技术改良，也已将其应用于动物实验和临床研究。以上两种人工毛发的组织相容性及远期效果仍然值得探讨。针对进一步降低人工毛发的术后不良反应、外观不自然，远期脱落率等问题，我们可以更加系统全面的对临床上各种类型的永久性脱发的的疗法进行补充和完善。本实验研究拟采用眼科镊和持针器在原有活结之上再打一个外科结，当纤维拉紧时形成的线结较前增大一倍，以期可以更牢固的将聚酰胺人工毛发纤维固定在头皮中。从而可以降低其远期脱落率。观察聚酰胺人工毛发纤维植入后的组织相容性及远期效果，探索其作为一种治疗毛发缺失疾病的新疗法广泛应用于临床的可能。
　　 材料与方法:
　　 1、实验材料及仪器
　　 聚酰胺人工毛发纤维(深圳天林实业有限公司，CE0373/TGA，Medicap Ltd.，<中文标题>=Carpi(MO)，Italy)，移植笔(Medicap Ltd授权，深圳天林实业有限公司)，持针器，眼科镊，压力蒸汽消毒器，光学显微镜，生物显微镜。
　　 2、聚酰胺人工毛发纤维的固定结改良
　　 聚酰胺人工毛发纤维外观与人发极为相似，其一端连有一个活结，用移植笔头的弯针所带的勾型头勾住该活结头就可准确地将纤维移植入头皮中。随着移植针头深入进头皮，活结滑动拉紧，固定在头皮下。现采用眼科镊和持针器在原有活结之上再打一个外科结，当纤维拉紧时形成的线结较前增大一倍，可以更牢固的固定在头皮中。本实验用纤维呈黑色，长度为15cm。
　　 3、聚酰胺人工毛发纤维的动物移植
　　 选取新西兰大白兔作为实验动物，将其随机分为A、B两组，A组为对照组，行常规方法移植;B组为实验组，行改良后方法移植。
　　 在白兔耳缘静脉注射3.0％戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，至瞬目反射消失。麻醉成功后，白兔呈俯卧位，固定其四肢;剃除白兔头顶部兔毛，备皮;使用0.3％碘伏、75％酒精消毒头部皮肤，铺无菌孔巾。使用移植笔针头勾住聚酰胺人工毛发纤维的结头，将其植入白兔头顶部皮肤至皮下，深度为2～3mm。每只兔子头顶部取两个区域进行移植，一个区域进行大体观察，另一区域行组织学观察。每个区域分别植入50根纤维，单只兔子共植入纤维100根。移植完成后修剪外露部的纤维长度，单层纱布轻轻覆盖移植创面，第二天将其取下。
　　 4、聚酰胺人工毛发纤维的远期脱落率观察
　　 术后定期观察白兔的头部伤口愈合情况，有无红肿、溃烂及移植纤维的整体外观。分别于术后1周，1个月，3个月，9个月，12个月对两组白兔头部遗留人工纤维进行计数，计算毛发的脱落率。
　　 5、聚酰胺人工毛发纤维的组织学观察
　　 在术后1周，1个月，3个月，9个月，12个月时，在无菌条件下将10只兔子组织观察区域内的全层头皮带聚酰胺人工毛发纤维一起取下，漂洗去血渍后用10％甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色，不同组织深度切片观察聚<中文标题>=酰胺人工毛发纤维周围的组织反应情况。
　　 6、统计学处理
　　 所得数据用SPSS16.0软件进行统计学处理，对常规纤维移植和改良后的纤维移植的年脱落率比较采用两独立样本t检验分析处理， P＜0.05为有显著差异。
　　 结果:
　　 1.移植的聚酰胺人工毛发纤维与真发外观相似，可通过特制移植器实现定向移植，移植后纤维方向良好，分布自然，外观效果满意。术后即时可见移植孔周围轻度出血红肿，一周后移植孔愈合，周围兔毛正常生长。至术后一年移植纤维处瘢痕肉眼不可辨，纤维周围未见有异常渗出，破溃及糜烂。
　　 2.观察对照组和实验组可以发现，在移植后一月内可见数量不等的移植物脱落，主要集中在移植术后一周，此后随着周围皮肤组织的包绕和聚酰胺人工毛发纤维固定结头的锚定，纤维脱落逐渐减少，在移植后半年后基本不再有脱落现象。1年后观察，对照组(A组)的平均脱落率约为24±2.4％，实验组(B组)的平均脱落率约为10±3.1％，二者之间存在显著差异(P＜0.0001)。
　　 3.移植后1周聚酰胺人工毛发纤维固定结头周围可以见到轻度的炎症反应细胞，毛细血管轻度充血，纤维周围可见到增生的上皮细胞包绕，炎症反应轻微;移植术后1个月，移植纤维周围组织的炎症细胞和淋巴细胞明显减少，胶原纤维增多，纤维周围依旧可见上皮细胞包绕，3-9个月后淋巴细胞及其它炎症反应细胞基本消失，胶原纤维增生反应明显，无色素沉着;1年后纤维周围只可见到大量的胶原纤维包绕，无淋巴细胞等炎症细胞浸润，局部无色素沉着。
　　 结论:
　　 综上所述，本实验通过使用精细眼科镊和持针器对聚酰胺人工毛发纤维的固定结头进行改良，增大其固定结头体积。通过动物实验可以观察到，聚酰胺人工毛发纤维具有良好的组织相容性，增大其固定结头并不会引起更强烈的组<中文标题>=织排斥，且移植后纤维外观与真发相似，改良后移植纤维脱落率大大降低。这很有可能在将来为临床大面积秃发患者提供更多的治疗选择。该聚酰胺人工毛发纤维可根据患者自身毛发的长度及色泽进行定制，用于修复大面积秃发，缩短患者手术时间、降低患者手术痛苦，并且可以省去临床毛发移植外科医师的毛囊提取程序，可为临床工作带来极大的方便。

目录

摘要

前言

第一章 改良后的聚酰胺人工毛发纤维的组织相容性及远期脱落率的实验研究

引言

材料与方法

1．1 实验材料和仪器

1．2 聚酰胺人工毛发纤维的固定结改良设计

1．3 实验动物

1．4 聚酰胺人工毛发纤维的动物移植

1．5 聚酰胺人工毛发纤维的远期脱落率观察

1．6 聚酰胺人工毛发纤维的组织学观察

1．7 统计学处理

结果

2．1 聚酰胺人工毛发纤维的外观效果

2．2 聚酰胺人工毛发纤维的远期脱落率观察

2．3 组织学观察

讨论

结论

第二章 综述

参考文献

附录

硕士期间发表论文情况

致谢

声明

统计学证明