香烟烟雾诱导CCR6-/-小鼠COPD模型肺组织中DCs、Th17、Treg变化及意义

摘要

目的：通过香烟烟雾诱导CCR6-/-小鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型，并观察小鼠肺组织内树突状细胞（DCs）表面分子CD80、CD1a及辅助性T细胞17（Th17）、调节性T细胞（Treg）的变化，进一步探讨COPD的发病机制。
　　方法：将C57BL/6背景的CCR6-/-小鼠和野生型C57BL/6小鼠各20只分为4组，CCR6-/-小鼠空气对照组10只，CCR6-/-小鼠烟熏组10只；野生型空气对照组10，野生型烟熏组10只。使用烟熏法建立COPD小鼠模型，实验第4周（28天）最后一次烟熏完后24小时内处死四组小鼠，并收集肺组织标本。取肺组织作石蜡切片、免疫组化染色及HE染色。通过免疫组化观察各组肺组织中CD80、CD1a、Th17、Treg的变化。
　　结果：⑴香烟烟雾可以诱导小鼠COPD形成，且CCR6-/-小鼠肺气肿与野生型小鼠比，得到改善；⑵烟熏前后野生型小鼠肺组织内CD80表达均高于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义，与各自空气对照组比较，烟熏组小鼠肺组织中CD80表达降低，差异具有统计学意义，且野生型小鼠烟熏前后肺组织中CD80变化值和变化率均大于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义；⑶烟熏前后野生型小鼠肺组织内CD1a表达均高于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义，烟熏组小鼠肺组织中CD1a表达与各自空气对照组相比增加，且野生型小鼠烟熏前后肺组织中CD1a变化值及变化率均大于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义；⑷烟熏前后野生型小鼠肺组织内Th17表达均高于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义，与各自空气对照组相比，烟熏组小鼠肺组织中Th17表达增加，差异具有统计学意义，且野生型小鼠烟熏前后肺组织中Th17变化值及变化率均大于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义；⑸烟熏前后野生型小鼠肺组织内Treg表达均低于CCR6-/-小鼠，差异具有统计学意义，烟熏组小鼠肺组织中Treg表达与各自空气对照组相比降低，差异具有统计学意义，且野生型小鼠烟熏前后肺组织中Treg变化值小于CCR6-/-小鼠，比较差异具有统计学意义，但烟熏后野生型小鼠Treg变化率高于CCR6-/-小鼠；⑹烟熏组小鼠肺组织中Th17/Treg的比值高于各自空气对照组，差异具有统计学意义，说明香烟诱导COPD小鼠模型中存在着Th17/Treg失衡，且野生型烟熏组小鼠高于CCR6-/-烟熏组小鼠，差异具有统计学意义。
　　结论：CCR6敲除后肺部炎症及肺气肿得到改善，说明CCR6在COPD发病过程中发挥着重要的作用，这可能与CCR6+细胞募集减少有关，特别是DCs和Th17；香烟烟雾导致iDCs增加，mDCs减少，提示DCs在COPD的发病机制中可能起着至关重要的作用；DCs可能通过抗原提呈，或分泌细胞因子影响T细胞所介导的免疫应答，从而可能引起Th17/Treg失衡，Th17/Treg失衡在COPD的发生、发展中可能发挥着重要的作用。

目录

声明

中英文缩写词表

前言

1 材料

1.1实验动物

1.2主要实验试剂

1.3主要实验仪器

2 方法

2.1 PCR

2.2 实验分组及动物模型建立

2.3 肺组织的收集

2.4肺组织病理形态检查

2.5统计学处理

3 结果

3.1PCR鉴定结果

3.2 四组小鼠一般情况

3.3 四组小鼠的体重变化

3.4 肉眼观察各组小鼠肺组织大体标本

3.5 烟熏后小鼠肺气肿形成，野生型小鼠肺气肿较CCR6-/-小鼠严重

3.6 各组小鼠肺组织中CD1a+DCs表达情况

3.7 各组小鼠肺组织中CD80+DCs表达情况

3.8 各组小鼠肺组织中IL-17+细胞表达情况

3.9各组小鼠肺组织中Foxp3+细胞表达情况

3.10各组小鼠肺组织中Th17/Treg的比值

4 讨论

5 结论

参考文献

综述:CCR6/CCL20轴、DCs在COPD发病机制中的作用研究

致谢

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