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动物性食品中硝基呋喃类代谢物残留的定量免疫层析技术研究

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英文缩略表

第1章 文献综述

1.1 研究目的和意义

1.2 硝基呋喃类药物简介

1.2.1 理化性质

1.2.2 毒理学

1.2.3 残留限量

1.3 硝基呋喃类代谢物残留的分析方法

1.3.1 仪器分析方法

1.3.2 免疫分析方法

1.4免疫层析技术(immunochromatographic assay, ICA)

1.4.1 标记材料

1.4.2 高通量免疫层析技术研究进展

1.5 研究内容和方法

1.5.1 呋喃西林代谢物单克隆抗体的制备

1.5.2 动物性食品中硝基呋喃类代谢物的背景荧光胶体金定量免疫层析技术研究

1.5.3动物性食品中硝基呋喃类代谢物多重彩色乳胶微球定量免疫层析技术研究

1.5.4 技术路线

第2章 呋喃西林代谢物单克隆抗体的制备

2.1 试验材料

2.1.1 试剂

2.1.2 仪器与设备

2.1.3 溶液体系

2.2 试验方法

2.2.1 抗原合成与鉴定

2.2.2 动物免疫

2.2.3 抗血清筛选

2.2.4 呋喃西林代谢物单克隆抗体的制备

2.2.5 单克隆抗体的纯化

2.2.6 抗体纯化后浓度

2.2.7 抗体性能鉴定

2.2.8 数据分析

2.3 结果与分析

2.3.1 免疫原和包被原的鉴定

2.3.2 抗血清的筛选

2.3.3 细胞融合生长状态

2.3.4 细胞亚克隆生长状态

2.3.5 抗体纯化后浓度

2.3.6 抗体性能鉴定

2.4 讨论

2.4.1 抗原合成

2.4.2 动物免疫

2.4.3 与已有SEM抗体的性能对比

2.5 本章小结

第3章 动物性食品中硝基呋喃类代谢物的背景荧光胶体金定量免疫层析技术研究

3.1 试验材料

3.1.1 试剂与耗材

3.1.2 仪器与设备

3.1.3 溶液体系

3.2 试验方法

3.2.1 胶体金的制备与鉴定

3.2.2 金标抗体的制备与鉴定

3.2.3 金标探针用量的优化

3.2.4 抗原与二抗的包被

3.2.5 bFQICA检测卡的组装

3.2.6 bFQICA方法检测步骤

3.2.7 标准曲线的建立和二维码的生成

3.2.8 交叉反应率的测定

3.2.9 样本前处理方法

3.2.10 动物性食品中硝基呋喃类代谢物的检测

3.3 结果与分析

3.3.1 bFQICA检测卡的原理

3.3.2 胶体金的鉴定

3.3.3 金标抗体的制备与鉴定

3.3.4 金标探针用量的优化

3.3.5 抗原和二抗的包被

3.3.6 标准曲线的建立

3.3.7 交叉反应率的测定

3.3.8 动物性食品中硝基呋喃类代谢物的检测

3.4 讨论

3.4.1 金标抗体的制备

3.4.2 样品前处理与基质效应对免疫反应的影响

3.4.3 与已有免疫分析方法的对比

3.5 本章小结

第4章 动物性食品中硝基呋喃类代谢物多重彩色乳胶微球定量免疫层析技术研究

4.1 试验材料

4.1.1 试剂与耗材

4.1.2 仪器与设备

4.1.3 溶液体系

4.2 试验方法

4.2.1 生物素化抗体的制备与纯化

4.2.2 乳胶微球标记抗体探针的制备和鉴定

4.2.3 LB-Ab探针用量的优化

4.2.4 抗原与乳胶微球的包被

4.2.5 样品垫的选择

4.2.6 LB-ICA免疫层析试纸条的组装

4.2.7 LB-ICA方法检测步骤

4.2.8 标准曲线的建立

4.2.9 交叉反应 率的测定

4.2.10 样本前处理方法

4.2.11 动物性食品中硝基呋喃类代谢物的检测

4.3 结果与分析

4.3.1 LB-ICA技术的原理

4.3.2 乳胶微球标记抗体探针的制备和鉴定

4.3.3 LB-Ab探针用量的优化

4.3.4 抗原与乳胶微球的包被

4.3.5 样品垫的选择

4.3.6 标准曲线的建立

4.3.7 交叉反应率的测定

4.3.8 动物性食品中硝基呋喃类代谢物的检测

4.4 讨论

4.4.1 乳胶微球标记抗体探针的制备

4.4.2 表面活性剂对免疫层析方法的影响

4.4.3 与已有免疫分析方法的对比

4.5 本章小结

第5章 结论、创新点与展望

5.1 结论

5.1.1 制备出高灵敏度和特异性的呋喃西林代谢物单克隆抗体

5.1.2 建立了分别检测动物性食品(鸡蛋、鸡肉、鱼和虾)中4种硝基呋喃代谢物残留的背景荧光胶体金免疫层析方法

5.1.3 建立了同时检测动物性(鸡蛋、鸡肉、鱼和虾)中4种硝基呋喃代谢物残留的高通量彩色乳胶微球免疫层析方法

5.2 创新点

5.3 展望

参考文献

致谢

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