动物性食品中兽药残留定量和确证分析关键技术研究

摘要

食品安全问题关系到国民的身体健康，已经成为人类共同关心的问题。兽药残留是影响动物性食品安全的主要原因之一，因此兽药残留分析方法是保障动物性食品安全的有效手段。兽药残留分析主要包括：样品前处理和分析检测技术两个方面。由于食品中兽药残留物水平低，样品基质复杂，使得复杂食品基质中兽药残留分析需要更为有效的前处理方法和灵敏的检测技术。目前，动物性食品中兽药残留定量和确证方法中存在的主要问题是：样品前处理方法，操作繁琐，耗时较长，试剂需要量大，同时分析药物种类少，提取样品的种类少。色谱分析方法，同时分离测定的药物种类少，检测灵敏度低，分离度差，基质干扰严重。因此，有必要对动物性食品中兽药残留定量和确证方法中样品前处理和色谱分析等关键技术进行研究。
　　 本论文主要研究内容是：研究简便、快速、低廉和有效的样品前处理技术，研究快速、灵敏的多组分同时分析的液相色谱和色谱-质谱联用技术，用于动物性食品中兽药残留检测。本论文以糖皮质激素类、苯并咪唑类和机胂类药物为研究目标，探讨动物性食品中兽药残留定量和确证方法中的样品前处理技术和色谱分析技术，建立动物性食品中糖皮质激素类、苯并咪唑类和机胂类药物残留检测方法。本论文的研究，可以为动物性食品中兽药残留的检测研究提供技术支持和理论依据，对动物性食品安全评价也具有指导意义和参考价值。
　　 1、动物性食品中糖皮质激素类药物多残留分析方法研究。
　　 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测猪、牛、羊肌肉和肝脏、鸡肌肉、鸡蛋和牛奶动物性食品中的糖皮质激素类药物方法(泼尼松、泼尼松龙、氢化可的松、地塞米松、倍他米松、氟氢可的松、甲基泼尼松、倍氯米松)。样品前处理采用碱水解，乙酸乙酯提取，硅胶固相柱萃取净化。采用碱水解，缩短了样品水解时间。采用硅胶固相萃取柱用于各种基质中糖皮质激素药物的萃取净化，简化了多种萃取柱多步净化的方法，样品操作简便，净化效果好。采用C18色谱柱，乙腈和水(0.2％甲酸)为流动相，成功地解决了地塞米松和倍他米松2种同分异构体分离的难题。质谱检测采用电喷雾离子源，多反应选择监测模式，方法具有灵敏度高，特异性好等特点。糖皮质激素类药物在肝脏中定量限为1.0μg/kg～4.0μg/kg，在牛奶中定量限为0.2μg～0.8μg/kg，在肌肉和鸡蛋中定量限为0.5μg/kg～2.0μg/kg。本方法已成功用于2008年北京奥运会动物性食品中糖皮质激素类药物监控。本方法简便、快速，适用于动物性食品中糖皮质激素类药物的定性和定量分析。
　　 2、动物性食品中苯并咪唑类药物多残留分析方法研究
　　 建立苯并咪唑类21种药物在猪、牛、羊、鸡肌肉和肝脏、鱼肌肉、鸡蛋和牛奶动物性食品中的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)和HPLC-MS/MS的定量和确证分析方法。样品前处理采用固相萃取技术和加速溶剂萃取技术，详细探讨了这两种提取净化技术的提取效果和影响因素。采用固相萃取净化，样品前处理简单，有机试剂用量少。采用快速溶剂萃取，样品前处理简便，快速，有机试剂用量少，可以实现自动化，减少有毒试剂对人体的污染。用固相萃取技术和加速溶剂萃取技术，解决了多种样品基质中，多种苯并咪唑类药物分析中的样品前处理技术的难题。采用C18色谱柱梯度洗脱，解决了21种苯并咪唑类药物采用HPLC测定时色谱分离的难题，建立了测定21种苯并咪唑类药物HPLC方法，在猪、牛、羊、鸡和鱼的肌肉、鸡蛋和牛奶中定量限为10μg/kg，猪、牛、羊和鸡肝脏中定量限为20μg/kg。优化了色谱和质谱参数，建立测定21种苯并咪唑类药物HPLC-MS/MS方法，在动物性食品中定量限为0.02μg/kg～0.5μg/kg，方法灵敏度高，特异性好。
　　 3、动物性食品中有机胂类药物多残留分析方法研究
　　 建立阿散酸、洛克沙胂、硝苯胂酸、卡巴胂4种有机胂类药物在猪、鸡肌肉和肝脏、鱼肌肉和鸡蛋动物性食品中的HPLC-UV和HPLC-MS/MS方法。样品前处理采用超声振荡萃取技术，以甲醇、乙腈和三氯乙酸混合溶液为提取剂，可以同时提取动物性食品中4种有机胂类药物；采用强阴离子交换(SAX)固相萃取柱净化，样品前处理简单，有机试剂用量少，基质干扰少。HPLC-UV方法采用Hypersil ODSC18色谱柱，乙腈和1％乙酸为流动相。HPLC-MS/MS方法采用HILIC Silica色谱柱，乙腈和乙酸铵为流动相。本方法采用HPLC-UV和HPLC-MS/MS同时测定动物源性食品中4种有机胂类药物，检测灵敏度高、特异性好。本方法可以广泛应用于动物源性食品中多种有机胂类药物的监测，对动物性食品中多残留分析方法研究具有指导意义，为动物性食品安全评价提供技术支持。