鸭坦布苏病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

摘要

目的：本研究建立了该病毒的一步法RT-PCR检测方法，可从病料中快速、敏感和特异地检测出DTMUV，为“鸭传染性卵巢炎”的流行病学研究和诊断提供了可靠的方法。方法：通过对鸭坦布苏病毒全序列测定分析，针对NS3基因设计一对引物，进行一步法RT-PCR扩增，扩增大小567bp，并对该方法的条件进行优化，并对106份临床病料进行实际检测。结果：该一步法RT-PCR检测方法能从阳性细胞毒和临床上患有DTMUV的病料组织样品扩增出与预期大小一致的目的片段，而对鸭的其它常见病原(DRV、DPV、NDV、MDPV、 DHV-A、EDSV和AIV ( H9N2 ) )中则没有扩增出任何片段。整个检测过程仅不到2.5h，最低可检测出1.82个TCID50的病毒量。结论：DTUMV在鸭群中普遍存在，仍然是导致种鸭和蛋鸭产蛋下降的重要病原。