Notch1基因沉默抑制骨髓源性脂肪祖细胞向成熟脂肪细胞分化

摘要

目的：探讨Notch1表达对骨髓源性脂肪祖细胞(BMAPCs)向脂肪细胞分化的影响. 方法：无菌取SD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液,差速贴壁法培养扩增.流式细胞分析检测表面标志表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)检测脂肪分化相关基因和Notch信号分子表达;实验分为空载体组和Notch1小RNA干扰组,Western blotting检测Norch1干扰效率;STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit行细胞成脂肪分化诱导,油红O染色且DAPI标记核检测成脂肪细胞百分率. 结果：BMAPCs表达CD34、CD44、CD45以及CD90;PCR扩增显示BMAPCs表达Ppaγ等6种脂肪分化标志基因以及Notch信号分子受体和配体;成脂诱导促进Notch1mRNA在BMAPCs表达,与第1天相比,成脂肪分化诱导第2天Notch1mRNA表达显著增加(P＜0.01);与空载体组相比,Notch1小RNA干扰组蛋白表达量显著降低(P＜0.05);与空载体组相比,Notch siRNA组Cebpa(P＜0.05)、Lpl(P＜0.05)、Ppaγ(P＜0.05)、S1c2a4(P＜0.01)及Fabp4(P＜0.01)mRNA表达均显著降低,而pread1mRNA表达显著增加(P＜0.05);与空载体组相比,Notch siRNA组脂肪细胞百分率显著降低(P＜o.05). 结论：Notch1基因沉默抑制骨髓源性脂肪祖细胞向成熟脂肪细胞分化.