不同频率脉冲电刺激对于Mc-3T3-E1细胞成骨分化的影响

摘要

众多研究表明,生物电信号能够调控成骨细胞的生长和分化,显示了良好的骨组织工程应用前景在各种电信号刺激的参数中,频率的选择是一个至关重要的因素.本研究的目的就是研究不同频率的电刺激信号对小鼠成骨细胞(Mc-3T3-E1)成骨相关基因表达的影响,探索控制成骨细胞生长与分化的电信号条件.将24孔细胞培养板改装成体外培养细胞的电刺激装置,不同频率的电信号由函数信号发生器产生,电信号用示波器实时监控.使用不同频率的脉冲电刺激作用于Mc-3T3-E1细胞,每天刺激30分钟,持续刺激1到12天.频率范围是1Hz到100KHz,占空比为50％,电压为200mV/cm.细胞增殖率用MTT法检测,成骨相关基因表达水平用Realtime PCR法检测,ALP含量用Fast Blue RR salt染色.通过细胞的成骨相关基因表达、细胞增殖以及ALP染色结果分析，当频率为100Hz时，电刺激促进Mc-3T3-EI细胞向成骨细胞分化的作用最为显著。