TH17细胞在中性粒细胞哮喘发病中的作用及其分化机制的初步研究

摘要

目的：初步探索TH17细胞在中性粒细胞性哮喘小鼠发病中的作用机制.方法：C57BL雌性小鼠随机分为对照组、中性粒细胞哮喘(NA)组、嗜酸性细胞哮喘(EA)组,每组每个检测指标6只小鼠.建立NA和EA两种哮喘小鼠模型,检测BALF中有核细胞总数及分类计数、Buxco小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性(AHR);流式细胞技术检测脾脏TH17、TH2细胞比例;酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17A (IL-17)、IL-5、IL-6、TGF-β水平;荧光定量PCR法检测小鼠脾脏维甲酸相关孤独受体(RORγt)-mRNA及细胞因子信号转导抑制因子(SOCS3-mRNA的表达.结果：1.NA组、EA组BALF中细胞总数、中性粒细胞百分比(NEU％)、嗜酸性粒细胞百分比(EOS％)均明显高于对照组(P＜0.05),NA组BALF中NEU％显著高于EA组和对照组(P＜0.05),EOS％高于对照组而低于EA组(P＜0.05);NA组、EA组AHR均明显高于对照组(P＜0.05),且NA组AHR明显高于EA组(P＜0.05);2.NA组、EA组脾脏TH17细胞比例、TH2细胞比例均高于对照组(分别P＜0.01,P＜0.05);3.NA组TH2/TH 17比例低于EA组(P＜0.01),且NA组BALF中IL-17水平高于EA组及对照组、IL-5水平明显低于EA组、高于对照组(分别P＜0.01,P＜0.05);4.NA组、EA组BALF中IL-6水平均高于对照组(均P＜0.01),且EA组BALF中IL-6的水平高于NA组(P＜0.01);5.NA组BALF中TGF-β水平略高于EA组及对照组(均P＜0.05);6.NA组、EA组脾脏RORyt-mRNA的表达均高于对照组(分别P＜0.05,P＜0.01),NA组高于EA组,但差异无统计学意义;7.NA组SOCS3-mRNA的表达低于对照组(P＜0.01),而EA组SOCS3-mRNA表达高于NA组及对照组(P＜0.05).结论：中性粒细胞性哮喘小鼠存在强烈的TH17细胞免疫、中度TH2细胞免疫反应,增高的IL-6、TGF-β形成了有利于中性粒细胞性哮喘小鼠TH17细胞优势分化的体内微环境,并通过RORyt和SOCS3两种途径共同调控TH17细胞的分化.