猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法对融合细胞进行筛选,阳性细胞经有限稀释法进行4次亚克隆后,获得了3株能稳定分泌抗重组N蛋白抗体的杂交瘤细胞,分别命名为JY(4)-1、JY(4)-2、JY(4)-3.间接ELISA检测3株杂交瘤细胞的细胞培养上清及免疫小鼠制备的腹水和血清中的抗体效价均为1:512、1:105、1:105,且单抗与猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PRV)抗原之间均无交又反应性.间接免疫荧光证实该单抗能与TGEV感染的ST细胞产生特异性免疫荧光.本研究制备的抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白单克隆抗体具有良好的特异性,为进一步建立猪传染性胃肠炎的诊断方法提供了条件.