鸭疫里默氏杆菌病和大肠杆菌病鉴别诊断PCR方法的建立

摘要

本研究从鸭疫里氏杆菌提取基因组DNA,以细菌16S rRAN基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏杆菌的部分16S rRNA基因,克隆及测序结果表明其全长1512bp,G+C含量为51％,该序列已被Genebank收录,编号为DQ078779.同时利用生物软件对GeneBank收录的鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌的16S rRNA基因序列进行分析后,设计了鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌的种特异性引物,分别能从各自的16S rRNA基因中扩增出长度为342和718bp的片段.并据此建立了一种能快速准确鉴别诊断鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌病的双重PCR方法,该方法能从磨碎的组织悬液煮沸后的上清、细菌培养物或提取的细菌基因组DNA中快速扩增出相应的片段,进行鉴别诊断.