鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病鉴别诊断双重PCR方法的建立和应用

摘要

本研究从鸭疫里默氏菌提取基因组 DNA,采用细菌 16S rRNA 基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏菌的部分 16S rRNA 基因,克隆及测序结果表明其全长 1 512 bp,G+C 含量为 51%,该序列已登入GenBank,登录号为 DQ078779.同时利用生物软件对 GenBank 收录的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的 16S rRNA 基因序列进行分析后,设计了鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的种特异性引物,分别能从各自的 16S rRNA 基因中扩增出长度为 342 和 718 bp 的 DNA 片段.并据此建立了一种能快速准确鉴别诊断鸭疫里默氏菌和大肠杆菌病的双重PCR 方法,该方法能从肝脏组织悬液煮沸后的上清、细菌培养物或提取的细菌基因组 DNA 中快速扩增出相应的片段,进行鉴别诊断.