兔出血症病毒衣壳蛋白VP60在大肠杆菌中的表达、纯化及活性检测

摘要

目的:表达、纯化RHDV VP60蛋白并检测其活性,建立RHDV-VP60-ELISA检测方法. 方法:将重组表达质粒pET-VP60转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,并在其中进行表达.采用脱盐以及金属鳌合亲和层析的方法对表达产物进行纯化.并用Western blotting方法检测表达产物的抗原性. 结果:在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达了重组RHDV VP60蛋白,经过纯化使蛋白纯度达到98％,经Western blotting方法检测表明该重组蛋白有一定的抗原性. 结论:通过原核表达可以得到具有抗原性的重组RHV VP60蛋白.