GFP和Luc双标技术在小鼠肿瘤模型建立中的应用

摘要

目的：建立GFP(Green fluorescent protein)/Luc(Luciferase)双标高效表达的人肺癌细胞系和人肝癌细胞系，利用活体成像系统观察裸小鼠肺原位移植瘤和肝原位移植瘤的生长情况。rn 方法：应用慢病毒转染的方法建立GFP/Luc双标的SPC-A-1和SMMC-7721细胞系，结合流式细胞分选技术使GFP/Luc双标表达率接近100％，分别接种于裸小鼠肺原位和肝原位，采用活体成像技术监测各稳定转染细胞在小鼠体内深部组织的表达情况。rn 结果：成功建立了GFP/Luc双标表达率接近100％的SPC-A-1-GFP/Lcu和SMMC-7721-GFP/Lcu细胞系，进行小裸鼠肺原位移植和肝原位移植后，应用活体成像系统观测到裸小鼠肺原位和肝原位早期的微小病灶和晚期移植瘤的生长情况,而且，随着肿瘤移植时间的延长，移植瘤体积的增大，活体成像检测到的发光面积逐渐增大，发光强度也逐渐增加。rn 结论：稳定表达GFP/Luc的细胞系，结合活体成像技术，能够对动物模型深部的肿瘤病灶进行活体、实时、定量检测，且灵敏度极高。为进一步研究肿瘤的发生及发展提供了理想的技术手段。