荧光定量RT-PCR

摘要： 为建立鉴别检测A型塞尼卡病毒(SVA)与O型、A型、亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)的方法,针对SVA 3D基因与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV VP1基因,分别设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同时检测SVA与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。所建立的方法能特异性扩增SVA及O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV,与其他主要猪源病毒无交叉反应;对SVA与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV质粒标准品的检出下限分别为2.50×10^(1)、2.50×10^(2)、2.50×10^(2)、2.50×10^(2)copies/μL;组内与组间重复性试验的变异系数均小于2%。应用所建立方法检测2019年来自广西的30份临床疑似样品,SVA和O型FMDV的检出阳性率分别为20%和70%,而未能检出A型和亚洲Ⅰ型FMDV。结果表明,本研究所建立的多重荧光定量RT-PCR方法为SVA与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV的临床检测和流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术手段。

摘要： 为了解安徽省禽群呼吸道病毒感染情况,2021年3—11月从12个县(市、区)17个家禽屠宰点和1个农贸市场收集472份喉头气管组织样本,运用荧光定量RT-PCR方法,对诱发家禽呼吸道疾病的主要病毒性病原进行检测。结果显示:除未检出高致病性禽流感病毒(AIV-H5、AIV-H7)核酸阳性外,新城疫病毒(NDV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV)、禽传染性喉气管炎病毒(ILTV)、禽偏肺病毒(aMPV)均有核酸阳性被检出,平均阳性率分别为9.96%、27.54%、1.06%、5.51%;NDV、IBV、aMPV的春季阳性率高于其他季节,夏季检出病原种类最多;皖南、皖中和皖北区域均有NDV阳性被检出,皖南区域的IBV阳性率最高,皖南、皖中区域均检出aMPV阳性,而ILTV阳性仅在皖北区域被检出;鸡群中的NDV、IBV、ILTV、aMPV阳性率高于鸭群。病毒感染以单一感染为主,占比为86.89%;单一感染中,IBV单一感染占比最高,为66.67%;混合感染中,IBV+NDV和IBV+aMPV双重感染占比较高,分别为45.83%和50.00%,仅检出1份三重感染样本(NDV+IBV+aMPV)。结果表明:安徽省家禽禽流感防控效果较好,但存在不同程度的NDV、IBV、ILTV、aMPV流行,其中IBV最为严重,且这些病原存在一定的季节和区域流行特征。因此,安徽省不同区域应根据不同病原流行特点,采取各有侧重的防控策略,完善疫病监测机制,在重点区域和高发季节加强疫病防控。

摘要： 为揭示复合亚氯酸钠(500 mg/L)杀灭烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的机理,采用荧光定量RT-PCR检测药剂处理后的病毒CP基因和Rep基因表达量,并利用间接酶联免疫吸附法测定了TMV CP的破坏程度;同时接种心叶烟,通过枯斑数统计分析了TMV的侵染活性;利用大片段步移RT-PCR检测TMV相关基因片段的损伤,并使用透射电镜观察药剂处理后病毒粒子被破坏的情况。结果显示:①药剂处理30 min可以完全抑制TMV CP基因的表达,处理60 min可完全抑制TMV Rep基因的表达。此时,TMV CP被完全破坏,病毒也完全丧失了对枯斑寄主心叶烟的侵染能力。②药剂处理30 min时,TMV的183kDa-1、183kDa-2、183kDa-3、183kDa-4、54kDa、CP&MP基因编码区等6个区域中的183kDa-2、183kDa-4和CP&MP区域首先被损伤,但接种叶叶脉和接种叶叶柄上的这3个区域可以正常扩增。处理45 min时,接种叶叶脉、接种叶叶柄和接种叶上部叶片的183kDa-1、183kDa-3和54kDa区域可以正常扩增,而其他3个区域不能正常扩增;对照叶、茎、接种叶下部叶片的6个区域均不能正常扩增。处理60 min时,各部位的基因组片段扩增结果均呈阴性。因此,可以确定药剂处理导致的CP损伤是造成病毒侵染性丧失的主要因素,核酸损伤与病毒失活无关。③透射电镜观察发现,药剂处理1.5 h后病毒粒体完全断裂成碎片状。

摘要： 成束状阿拉伯半乳糖蛋白(FLAs)在木质部发育过程中起重要调控作用,对山新杨(Populus davidiana×P.alba var.pyramidalis)FLA基因进行生物信息学及其在山新杨不同组织中的表达模式进行了分析,筛选与木质部发育相关的FLA基因,为鉴定其调控山新杨材性形成的调控机制及分子改良奠定基础。利用拟南芥FLA家族蛋白序列在山新杨基因组序列中进行比对,共获得11条PdbFLAs,编码区长度为540至1 440 bp。对其蛋白理化性质、高级结构、系统进化、基序分布、启动子元件等进行分析。结果表明:蛋白结构和基序分析可将PdbFLAs分为3个亚类,每个亚类的蛋白结构和基序组成较为保守;系统进化分析可将PdbFLAs分为4组,这其中PdbFLA1、PdbFLA2、PdbFLA4、PdbFLA9与毛果杨、拟南芥中调控本质部发育相关基因聚为一组,推测该组内的PdbFLAs也具有类似功能;在PdbFLAs启动子中发现了与光、脱落酸(ABA)、胁迫响应和次生壁形成相关的重要顺式元件。对人工弯曲处理的山新杨木质部表型进行分析,发现树干出现偏心生长,应拉木组织被染成绿色,显示其纤维素质量分数高于对应木和直立木,木质化程度有所降低。利用荧光定量RT-PCR对PdbFLAs在根、茎、叶以及应拉木、对应木和直立木不同组织的表达模式进行分析,结果显示:PdbFLA1在茎和应拉木中高度表达,说明在山新杨木质部发育过程中PdbFLA1具有重要的调控作用。

摘要： 为快速、准确、灵敏检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),以PEDV N基因为靶标设计引物,建立了一种PEDV SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法。该方法最低可以检测到10个拷贝的病毒核酸,与猪传染性胃肠炎病毒、猪δ冠状病毒和猪轮状病毒等胃肠道病毒均无交叉反应,批内、批间重复试验的变异系数均在2%以内,表明该方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。运用该方法对2018—2019年采集自山东省不同地区猪场的161份临床样品进行检测,检测结果与RT-PCR方法完全一致。以上结果说明,本试验所建立的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测方法为PEDV的快速检测提供了良好工具和技术支持。

摘要： 目的了解2016-2018年广州地区儿童腹泻中诺如病毒感染的情况,为临床诊断和病毒性腹泻疾病的防控提供可靠数据。方法收集2016年1月至2018年12月住院和门诊的腹泻12岁以下儿童粪便标本856份,采用荧光定量RT-PCR检测方法检测诺如病毒核酸,确定是否感染阳性,并从患者感染年龄、性别、时间等方面比较分析。结果856例腹泻标本中,诺如病毒感染阳性259例,阳性率为30.25%;其中不同年龄段腹泻儿童的诺如病毒检出阳性率依次分别为0~1岁组35.11%(构成比53.28%),1~2岁组30.13%(构成比16.99%),2~3岁组32.47%(构成比19.31%);0~3岁儿童阳性率构成比共占89.58%;以每年11~12月(冬季)和1~3月(春季)为发病高峰期(5个月构成比为81.47%);从病毒不同基因型分析,GI型和GII型诺如病毒检出率分别为10.9%和19.4%。结论诺如病毒是导致儿童腹泻的重要病原之一,0~3岁儿童是诺如病毒的易感人群,以冬春季节为流行高峰,GII型为主要基因型。

摘要： 为了解猪巴氏杆菌病在成都地区猪群中的感染和流行情况,从而采取更有针对性的防控措施,2020年2～12月,笔者从成都地区三个无害化处理厂采集了1037份病死猪的淋巴结、脾脏和肝脏混合样品,用荧光定量RT-PCR方法检测猪巴氏杆菌病病原.结果显示:猪巴氏杆菌病核酸阳性的有93份,阳性率达8.97％,表明猪巴氏杆菌病感染存在于成都地区的猪群中.

摘要： 目的 研究常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒,比较两种检测方式的效果.方法 选取2019年7月至2020年7月我院收治的210例腹泻患者粪便为研究对象,应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR进行检测,比较两种检测方法的检测结果.结果 两种检测方法特异性均较强,与轮状病毒、札幌病毒、星状病毒之间无交叉反应,相同体系GⅠ、GⅡ型诺如病毒之间无干扰.常规RT-PCR的最低检测下限是103 copies/μL,荧光定量RT-PCR的最低检测下限是102 copies/μL.常规RT-PCR的检测率为5.71％(12/210),符合率为66.67％(12/18),荧光定量RT-PCR的检测率为8.57％(18/210),符合率为100.00％(18/18);对18例阳性样本进行测序分析,均证实为诺如病毒.结论 常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR均能快速检测诺如病毒,荧光定量RT-PCR更加灵敏,具有较高的符合率.

摘要： 为满足高通量快速检测野鸟中禽流感病毒的需要,本研究针对A型流感病毒M基因保守区域设计了一对引物和探针,建立了一种能够检测A型禽流感病毒的实时荧光定量PCR方法,并对该方法的灵敏性、特异性和稳定性进行了评估.结果显示,该方法相较于传统的鸡胚分离和RT-PCR方法,具有灵敏度高、特异性好和耗时短等优点,可用于检测野鸟中携带的禽流感病毒.

摘要： 为建立一种快速检测H7N9亚型流感病毒的通用荧光RT-PCR方法,根据GenBank数据库中收录的相关基因组序列,应用Primer 5.0软件设计合成针对H7和N9序列的特异性引物和TaqMan探针,并对该方法开展特异性、敏感性、重复性试验.结果显示:H7和N9核酸片段最低检测限均为1.7×103 copies/mL;使用该方法重复检测10次,H7和N9核酸片段检测的变异系数(CV)<1％,说明稳定性良好;利用第二代人感染H7N9流感病毒核酸检测试剂国家参考品样品,测得该方法灵敏度为100％(10/10)、特异度为100％(20/20).结果表明,本研究建立的H7N9亚型流感病毒荧光定量RT-PCR方法快速、准确、稳定性高、特异性好,为控制流感病毒传播增添了技术手段.

摘要： 根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法.通过优化反应体系和反应条件,该方法对101～107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系.利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性(n=140)、SBV核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证.结果表明,所建立方法与FLI研制的SBV荧光定量RT-PCR具有相近的敏感性,两者对140份SBV核酸阳性样品的检测符合率达96.4％(135/140);可灵敏地检测出1TCID50的SBV RNA,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(Douglas virus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应.用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的RNA进行了检测,结果未发现SBV核酸阳性样品.SBV荧光定量RT-PCR检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段.

摘要： 根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法.通过优化反应体系和反应条件,该方法对101～107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系.利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性(n=140)、SBV核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证.结果表明,所建立方法与FLI研制的SBV荧光定量RT-PCR具有相近的敏感性,两者对140份SBV核酸阳性样品的检测符合率达96.4％(135/140);可灵敏地检测出1TCID50的SBV RNA,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(Douglas virus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应.用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的RNA进行了检测,结果未发现SBV核酸阳性样品.SBV荧光定量RT-PCR检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段.

摘要： 根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法.通过优化反应体系和反应条件,该方法对101～107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系.利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性(n=140)、SBV核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证.结果表明,所建立方法与FLI研制的SBV荧光定量RT-PCR具有相近的敏感性,两者对140份SBV核酸阳性样品的检测符合率达96.4％(135/140);可灵敏地检测出1TCID50的SBV RNA,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(Douglas virus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应.用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的RNA进行了检测,结果未发现SBV核酸阳性样品.SBV荧光定量RT-PCR检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段.

摘要： 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法，根据GenBank中登录的BVDV基因序列，针对5’UTR的保守序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化，建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT—PcR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，并对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测。结果显示，建立的方法能检测到BVDV，而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性，具有高度的特异性。在所检测的20份样品中，BVDV阳性6份(30％)。对所构建的标准品进行检测，在102～108拷贝／μL的范围内可以得到良好的动力学曲线，能检测低至103～104拷贝／mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点，可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。

摘要： 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法，根据GenBank中登录的BVDV基因序列，针对5’UTR的保守序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化，建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT—PcR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，并对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测。结果显示，建立的方法能检测到BVDV，而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性，具有高度的特异性。在所检测的20份样品中，BVDV阳性6份(30％)。对所构建的标准品进行检测，在102～108拷贝／μL的范围内可以得到良好的动力学曲线，能检测低至103～104拷贝／mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点，可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。

摘要： 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法，根据GenBank中登录的BVDV基因序列，针对5’UTR的保守序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化，建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT—PcR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，并对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测。结果显示，建立的方法能检测到BVDV，而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性，具有高度的特异性。在所检测的20份样品中，BVDV阳性6份(30％)。对所构建的标准品进行检测，在102～108拷贝／μL的范围内可以得到良好的动力学曲线，能检测低至103～104拷贝／mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点，可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。

摘要： 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法，根据GenBank中登录的BVDV基因序列，针对5’UTR的保守序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化，建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT—PcR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，并对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测。结果显示，建立的方法能检测到BVDV，而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性，具有高度的特异性。在所检测的20份样品中，BVDV阳性6份(30％)。对所构建的标准品进行检测，在102～108拷贝／μL的范围内可以得到良好的动力学曲线，能检测低至103～104拷贝／mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点，可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。

摘要： 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法，根据GenBank中登录的BVDV基因序列，针对5’UTR的保守序列，设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化，建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT—PcR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，并对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测。结果显示，建立的方法能检测到BVDV，而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性，具有高度的特异性。在所检测的20份样品中，BVDV阳性6份(30％)。对所构建的标准品进行检测，在102～108拷贝／μL的范围内可以得到良好的动力学曲线，能检测低至103～104拷贝／mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点，可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。

摘要： 近年来，随着人们生活水平的提高，猪肉的肉质问题得到了消费者和生产者重视，遗传基础是改善肉品质的关键。猪脂肪细胞定向和分化因子1(ADD1)在脂肪细胞分化中起着重要作用，准确度量脂肪组织中ADD1 mRNA的表达量成为许多学者所关注的重点之一，因而建立有效的ADD1mRNA定量方法也是非常必要的。本研究旨在通过T-A克隆法克隆猪ADDl cDNA，做为ADD1 mRNA实时荧光定量检测质粒标准品，从而建立一种准确、简便的检测方法。为探讨脂肪细胞分化机理，以及其如何调控肉质性状提供依据。

摘要： 近年来，随着人们生活水平的提高，猪肉的肉质问题得到了消费者和生产者重视，遗传基础是改善肉品质的关键。猪脂肪细胞定向和分化因子1(ADD1)在脂肪细胞分化中起着重要作用，准确度量脂肪组织中ADD1 mRNA的表达量成为许多学者所关注的重点之一，因而建立有效的ADD1mRNA定量方法也是非常必要的。本研究旨在通过T-A克隆法克隆猪ADDl cDNA，做为ADD1 mRNA实时荧光定量检测质粒标准品，从而建立一种准确、简便的检测方法。为探讨脂肪细胞分化机理，以及其如何调控肉质性状提供依据。

摘要： 本发明涉及荧光定量检测领域，提供了一种高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针，所述纳米复合探针包括负载待检测血清肿瘤标志物二抗和DNA酶链的金纳米粒子。本发明提供的纳米复合探针，以金纳米粒子为载体，负载了高催化特性的脱氧核酶，形成的复合物既保留了脱氧核酶的高催化特性和识别能力，又引入了纳米材料的信号转导功能，实现了识别与信号转导功能的一体化。结合肿瘤标志物高效的特异性识别功能、脱氧核酶的高识别和催化特性结合以及金纳米粒子的信号转导和荧光放大功能显著提高了荧光定量检测的灵敏度和特异性，检测灵敏度可达到0.01ng/mL。

摘要： 本发明提供了一种三重荧光定量PCR引物探针组与三重荧光定量PCR试剂盒，涉及生物技术领域。本发明的PCR引物探针组包括SEQ ID NO.1所示的APP‑F、SEQ ID NO.2所示的APP‑R、SEQ ID NO.3所示的APP‑探针，SEQ ID NO.4所示的HPS‑F、SEQ ID NO.5所示的HPS‑R、SEQ ID NO.6所示的HPS‑探针，SEQ ID NO.7所示的Pm‑F、SEQ ID NO.8所示的Pm‑R、SEQ ID NO.9所示的Pm‑探针。将该引物探针组制备成试剂盒，可特异的同时检测APP、HPS和Pm，灵敏度能达到10拷贝/μl。

摘要： 本发明公开了一种可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：第一步，以待测样品的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；第二步，检测扩增产物的荧光信号；第三步，以检测结果的Ct值判定样品中是否含有大肠埃希氏菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、诺如病毒GI、诺如病毒GII和轮状病毒。本发明还公开了一种可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测试剂盒，可以用于定性检测蔬菜中是否含有大肠埃希氏菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、诺如病毒GI、诺如病毒GII和轮状病毒。

摘要： 一种用于检测水貂圆环病毒的荧光定量PCR引物组和荧光定量PCR试剂盒，涉及水貂圆环病毒检测领域，包括：MiCV荧光定量PCR反应液、阳性质控品和阴性质控品；MiCV荧光定量PCR反应液包括上下游引物、TBPremix Ex TaqTMII和ddH2O；上游引物：5'‑AGGGCCTTTGGGCATCATTG‑3'；下游引物：5'‑CCCGCCTGCAAACTGAAGAA‑3'。本发明根据水貂圆环病毒的Cap基因保守序列设计引物，通过反应体系和条件优化建立了基于SYBR Green II的实时荧光定量PCR技术并组装试剂盒，该试剂盒具有稳定性好、敏感性和特异性较高等优点。

摘要： 本发明属于D型流感病毒检测技术领域，具体涉及D型流感病毒荧光定量PCR与LAMP荧光定量PCR引物对及其应用。D型流感病毒主要感染动物中包括猪和牛，对畜牧业的发展具有一定的威胁，提供稳定可靠的检测方法具有重要的意义。本发明提供了一种用于D型流感病毒实时荧光定量PCR检测的引物序列及相应的试剂盒，该引物针对D型流感病毒HE基因中的保守序列进行设计，能够实现良好的检测特异性和灵敏度，敏感性比普通PCR和荧光定量LAMP均高100倍，可以实现大量通用样品的检测，可对D型流感病毒进行快速、高敏感度的实时荧光定量PCR检测，对于提高D型流感病毒的检测精度具有重要的意义。

摘要： 本发明涉及荧光定量检测领域，提供了一种高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针，所述纳米复合探针包括负载待检测血清肿瘤标志物二抗和DNA酶链的金纳米粒子。本发明提供的纳米复合探针，以金纳米粒子为载体，负载了高催化特性的脱氧核酶，形成的复合物既保留了脱氧核酶的高催化特性和识别能力，又引入了纳米材料的信号转导功能，实现了识别与信号转导功能的一体化。结合肿瘤标志物高效的特异性识别功能、脱氧核酶的高识别和催化特性结合以及金纳米粒子的信号转导和荧光放大功能显著提高了荧光定量检测的灵敏度和特异性，检测灵敏度可达到0.01ng/mL。

摘要： 本发明提供了一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；PCR引物包括上游引物和下游引物；反应体系包括以下组分：上游引物，下游引物，SYBR Premix Ex TaqⅡ，ROX Reference DyeⅡ，样品DNA模版，ddH

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种荧光定量PCR反应液及试剂盒和荧光定量PCR方法。所述荧光定量PCR反应液，包括如下的原料制备而成：二甲亚砜，牛血清蛋白，DNTP，10×SYBR荧光染料，10×PCR buffer，溶质体积百分数为30％的甘油溶液和Ex-Taq酶。本发明优化了PCR实验的荧光定量PCR反应液，特别是加入一定比例的甘油溶液，以保证Ex-Taq酶的活性，加入BSA与DMSO的组合保证了Tag酶的稳定性及活性并减少引物二聚体的形成，减少荧光定量PCR反应液配置时间，所得PCR反应液可以长期保存在-20°C中，使用方便。

摘要： 本实用新型公开了一种荧光定量PCR光学激发装置及成像装置、荧光定量PCR仪，其中荧光定量PCR光学激发装置包括光源，该光源的出光方向上设有激发光滤光片和二向色镜，还包括设于激发光滤光片与二向色镜之间的光均匀化透镜组；所述光均匀化透镜组包括平行透镜、复眼透镜和积分透镜，激发光滤光片、平行透镜、复眼透镜、积分透镜、二向色镜沿光源的出光方向依次设置；所述光源为宽光谱光源。本实用新型能够获得照度均匀的激发光，并能够在不同的光谱通道进行检测，使用寿命长，光源更换次数少；成像效果好；尤其适用于微流体芯片的荧光定量PCR检测。

摘要： 本实用新型涉及一种POCT荧光定量分析仪的光路系统及POCT荧光定量分析仪，光路系统包括激发光源、用于调整激发光源发出的光的光斑大小的光源整形光路及荧光接收光路，光路系统还包括转动设置的二向分光镜，二向分光镜用于反射经光源整形光路后的光且透射荧光，激发光源发出的光经光源整形光路后照射到二向分光镜，二向分光镜将经光源整形光路后的光反射到试纸条的检测线以激发检测线上的荧光，荧光被二向分光镜透射后被荧光接收光路接收，二向分光镜的转动使光能够反射到试纸条的不同检测线上。本实用新型的光路系统采用转动设置的二向分光镜，实现对试纸条上的检测线进行逐条顺序扫描检测，简洁化了光学扫描机构的结构设计，避免了较复杂的直线传动扫描方法。