色素上皮

摘要： 患者,女,55岁,因“双眼夜盲、视力逐渐下降20余年,右眼视物变形3个月”就诊。既往无眼部就诊史,否认家族史,视力:右眼0.06,左眼0.04,矫正后双眼视力均不能提高。眼科检查:双眼角膜透明,前房轴中,晶状体前囊可见异常物质。瞳孔直径约3 mm,对光反射(+)。眼底:视盘界清色可,后极部可见大量黄白色结晶样物质,主要分布在黄斑和视盘周围。左眼黄斑区萎缩严重,黄斑中心凹反光消失,结构不清。未见骨细胞样色素沉积。视网膜动脉管径变细,视网膜血管走行大致正常。双眼超广角眼底照相示:后极部黄白色结晶样物质沉积,可以透见脉络膜血管。双眼自发荧光示:后极部多灶性斑片状低荧光,提示大量色素上皮萎缩(见图1)。

摘要： 1.功能小梁是指:A.小梁网的前1/3;B.小梁网的前2/3;C.小梁网的后1/3;D.小梁网的后1/3。2.眼电图(EOG)产生于视网膜的哪个部分?A.色素上皮;B.视杆细胞;C.视锥细胞;D.双极细胞。3.婴幼儿视力检查法不包括:A.遮盖实验;B.视动性眼球震颤法;C.视觉诱发电位;D.对比敏感度。4.含绿敏色素视锥细胞对下列哪种波长的光波最敏感?A.570 nm;B.540 nm;C.440 nm;D.500 nm。5.下列有关色觉的叙述,错误的是:A.绿色弱较绿色盲更常见。

摘要： 患儿,男,4岁,家长诉患儿双眼自幼视力不佳于深圳市眼科医院就诊。患儿为第1胎,足月顺产,其母孕期无药物服用史及放射线接触史,父母非近亲婚配,父母及其他家族成员中未见类似遗传性疾病史。4个月前患儿因右眼角膜皮样囊肿于外院行手术治疗,具体治疗过程不详。体格检查:双侧面部对称,听力正常,右耳屏处见2个副耳(图1)。眼科检查:右眼裸眼视力0.1,+7.00 DS矫正无提高;左眼裸眼视力0.12,+7.00 DS/-1.25 DC×160°矫正至0.15;双眼眼压未见异常。右眼闭合完全,睑结膜轻度充血,角膜颞下方可见3 mm白色斑翳(图2),余角膜透明,前房深度正常,晶状体透明,视盘边界清晰,色淡红,略向鼻下方倾斜,杯盘比为0.2,黄斑中心凹反光未见,黄斑区可见弥漫斑片状色素沉着,视网膜平伏,鼻侧及下方散在白色点状病灶,动脉走行迂曲,周边部沿动脉可见色素沉着带,后极部广泛色素上皮萎缩;左眼角膜透明,前房深度正常,晶状体透明,眼底视盘边界清晰,色淡红,略向鼻下方倾斜,杯盘比为0.3,黄斑中心凹反光未见,黄斑区可见弥漫斑片状色素沉着,视盘鼻下方见约1/2 PD大小视网膜脉络膜凹陷,余视网膜平伏,鼻侧及下方散在白色点状病灶,动脉走行迂曲,周边部沿动脉可见色素沉着带,后极部可见广泛色素上皮萎缩(图3,4)。

摘要： 目的:探讨脉络膜骨瘤患眼的眼底多模式影像特征.方法:回顾性病例观察研究.选取2015-10/2019-08在西安市第三医院眼科检查确诊且资料完整的脉络膜骨瘤患者9例15眼纳入研究.所有患者均接受眼底彩色照相、短波长眼底自发荧光(SW-AF)、红外眼底自发荧光(IR-AF)、眼底荧光素血管造影(FFA)、吲哚菁绿血管造影(ICGA)、光学相干断层扫描成像(OCT)以及眼眶X线电子计算机断层扫描(CT)检查.结果:眼底彩色像显示15眼中,病变累及黄斑及视盘5眼(33％),仅累及黄斑8眼(53％),位于视盘旁2眼(13％);所有患眼的脉络膜骨瘤均呈橙红色或黄白色,表面有色素沉着.SW-AF检查显示15眼(100％)的脉络膜骨瘤及其周围均有斑驳状低荧光及高荧光,而IR-AF检查则显示所有脉络膜骨瘤所在部位有点、片状高荧光及低荧光.FFA显示15眼(100％)的脉络膜骨瘤在造影过程中亮度逐渐增强,其中6眼(40％)有剧烈渗漏荧光的视网膜下新生血管(SRNV)呈现.ICGA显示9眼(60％)存在SRNV,造影早期所有脉络膜骨瘤对应部位呈低荧光,造影过程中瘤体亮度逐渐增强.OCT显示10眼(67％)的脉络膜骨瘤呈强、弱不均匀反射,5眼(33％)的脉络膜骨瘤呈弱反射,所有患眼均有视网膜神经上皮下暗反射腔.15眼(100％)的脉络膜骨瘤在CT图像上均呈高密度骨性肿块.结论:脉络膜骨瘤呈橙红色或黄白色,其在CT图像上为骨性表现,这是诊断脉络膜骨瘤的重要依据.脉络膜骨瘤所在区域有视网膜色素上皮受损所致斑驳状强、弱不均的SW-AF及IR-AF.FFA及ICGA可明确病变区域异常循环状况.OCT可显示瘤体切面反射强弱不一,并有助于观察视网膜下积液及新生血管状况.

摘要： 目的 研究极低频电磁场（ELF-EMF）作用下体外培养的人视网膜色素上皮细胞（hRPE）的分子病理改变,探讨其在近视发生发展中的可能作用机制.方法 实验研究.根据细胞是否暴露于50 Hz电磁场分为暴露组和非暴露组,观察hRPE细胞形态的改变,CCK8检测hRPE细胞的增殖活性,应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测hRPE细胞表达基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）、转化生长因子-β2（TGF-β2）及成纤维细胞生长因子2（FGF-2）的情况.ELISA检测hRPE细胞培养上清中TGF-β2及FGF-2的表达情况,并用独立样本t检验进行分析.结果 与非暴露组相比,暴露组hRPE细胞形态发生改变;hRPE细胞的增殖活性降低,差异有统计学意义（6＆#215; 103/孔,t=-7.069,P＜0.01;8＆#215;103/孔,t=-3.652,P＜0.05;10＆#215;103/孔,t=-6.974,P＜0.05）;RT-PCR分析显示,暴露组hRPE细胞MMP-2、TIMP-2及TGF-β2 mRNA表达水平较非暴露组均增高,差异有统计学意义（t=10.562、6.277、4.940,P＜0.01）;而暴露组FGF-2 mRNA表达水平较非暴露组低,差异有统计学意义（t=-6.905,P＜0.01）.ELISA检测显示暴露组hRPE细胞上清中TGF-β2表达上调,FGF-2表达下降,与非暴露组相比差异有统计学意义（t=-4.079、4.441,P＜0.05）.结论 ELF-EMF在一定范围内影响体外培养的hRPE细胞的增生及相关细胞因子和基质金属蛋白酶的表达,ELF-EMF可能通过调控hRPE细胞病理改变进而诱导近视的发生发展.

摘要： 目的 观察p44/42 MAPK激酶抑制剂PD98059和PI3K/Akt激酶抑制剂LY294002对非酶糖基化终产物(advanced glycation end-products,AGE)诱导的人视网膜色素上皮细胞株ARPE-19细胞表达血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)的影响.方法 分别用不同浓度AGE和AGE作用不同时间干预ARPE-19细胞,ELISA方法检测ARPE-19细胞外VEGF蛋白表达水平,免疫细胞荧光法检测磷酸化p44/42和Akt的表达;以PD98059和(或)LY294002预处理ARPE-19细胞后再用AGE干预,并测定ARPE-19细胞外VEGF水平、磷酸化p44/42和Akt活性.结果 随着AGE浓度或作用时间增加,ARPE-19细胞表达VEGF外增加,AGE浓度为100 mg·L-1或作用8h时达高峰,表达水平分别为(304.55±20.51)ng·L-1、(293.54±13.98)ng·L-1,同时p44/42和Akt信号分子激活.使用PD98059或LY294002预处理后,p44/42和Akt低表达,AGE诱导的ARPE-19细胞外VEGF表达也降低,并与PD98059和LY294002呈剂量依赖性,当使用20 μmol·L-1PD98059和30μmol· L-1 LY294002时,VEGF的表达最低,分别为(57.35±5.29)pg·L-1、(81.51±8.10)pg·L-1,但VEGF的表达量仍与AGE浓度和作用时间呈正相关(P＜0.01);同时使用PD98059和LY294002预处理,AGE诱导的VEGF表达与AGE的作用时间无关(P＞0.05).结论 p44/42 MAPK和Pl3K/Akt信号通路是AGE诱导ARPE-19细胞表达VEGF的重要细胞内信号通路,PD98059和LY294002可抑制AGE诱导的人RPE细胞外VEGF表达.

摘要： @@ 众所周知, 适量的光线对视觉的形成是非常必要的.相反,如果光线的强度、光照的时间等超过了视网膜的承受力, 那么将会造成视网膜的光损伤.光损伤后视网膜成分的丢失可能涉及凋亡,而Caspase3是细胞凋亡的的必经之路.重组人促红细胞生成素(rhEPO)可抑制光化学损伤诱导的人RPE细胞的凋亡,对人RPE细胞的光化学损伤有保护治疗作用［1］.本课题建立光损伤模型,应用外源性EPO进行治疗,观察EPO与凋亡、Caspase3的关系,探讨EPO的保护作用,为其临床应用治疗视网膜光损伤类疾病提供理论依据.

摘要： 目的 研究过氧化氢（H2O2）诱导的氧化应激对人视网膜色素上皮（ARPE-19）细胞内年龄相关性黄斑病变易感因子2（age-related maculopathy susceptibility 2,ARMS2）转录和蛋白水平的影响,初步探讨ARMS2基因在氧化应激中对视网膜色素上皮细胞的作用.方法 实验研究.选用ARPE-19细胞,以浓度为0、100、300、500、700μmol/L的H2O2作用一定时间后,应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测各浓度组H2O2作用2 h和4 h后ARPE-19细胞生长情况;采用Realtime-PCR（SYBR Green法）和细胞免疫荧光法检测ARMS2的转录及蛋白水平变化.组间比较均采用单因素方差分析,两两比较采用最小显著性差异法,H2O2浓度与细胞活性的关系采用曲线估计分析.结果 五个浓度的H2O2作用ARPE-19细胞4 h后,吸光度值分别为0.531±0.037、0.370±0.017、0.371±0.016、0.330±0.006和0.297±0.012,差异有统计学意义（F=6.782,P=0.007）.曲线估计分析显示H2O2浓度与细胞活性呈高度负相关（r=-0.99.P=0.036）.100～700 μmol/L H2O2作用ARPE-19细胞后,Realtime-PCR结果 Ct值分别为1.154±0.007、1.324±0.022、1.350±0.011、1.280±0.031,差异有统计学意义（F=33.409.P=0.000）;H2O2浓度在300～500 μmol/L范围时,ARMS2基因mRNA表达量达到高峰,之后下降.细胞免疫荧光检测灰度值结果分别为7320±2493、14 300±848、22400±1596、23400±2405、19 200±561,差异有统计学意义（F=22.843,P=0.000）;H2O2浓度在300～500 μmol/L范围时,ARMS2蛋白表达量达到高峰,之后下降.转录和蛋白水平变化趋势一致.结论 H2O2在一定浓度范围内时,可诱导氧化应激,使ARPE-19细胞内ARMS2转录和蛋白水平增加,如果H2O2的浓度超过ARPE-19细胞耐受范围,ARMS2基因表达量下降.

摘要： 目的 探讨添加脑源性神经生长因子（BDNF）、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的培养基联合人类视网膜色素上皮细胞（HRPECs）共培养对骨髓间充质干细胞（BMSCs）定向诱导分化的影响.方法 实验研究.实验分三组：HRPECs＋BDNF、EGF、bFGF＋BMSCs共培养组、BDNF、EGF、bFGF＋BMSCs共培养组和对照组（单独BMSCs）.第一组取第3代HRPECs接种在双层培养板的上层,将第3代人BMSCs接种于下层培养板中,在双层六孔板的每孔中加入混合有20 ng/mlbFGF、20 ng/ml EGF、20 ng/ml BDNF及10%胎牛血清（FBS）的DMEM-LG培养液（需做免疫细胞化学染色应同时在下层放入18 mm×18 mm盖玻片进行细胞爬片）.第二组取第3代人BMSCs接种在六孔培养板中,每孔中加入含20 ng/ml bFGF、20 ng/ml EGF、20 ng/ml BDNF及10%FBS的DMEM-LG培养液.第三组将第3代人BMSCs接种于六孔培养板中,加入10%FBS的DMEM-LG培养液.在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化.2周后停止培养,采用免疫细胞化学染色法和RT-PCR检测角蛋白18、RPE65蛋白存诱导细胞中的表达.数据采用Holm-Sidak法进行分析.结果 诱导2周后,第一组BMSCs细胞呈圆形、类圆形、不规则形、短棒状外观,细胞内有色素颗粒形成,其他两组没有类似改变.三组间免疫细胞化学染色法检测RPE65蛋白、角蛋白18,光密度值结果显示第一组和第二组间、第一组和第三组间差异有统计学意义（RPE65：t=37.416、36.236,P＜0.05;角蛋白18：t=38.611、37.532,P＜0.05）.而第二组和第三组间差异没有统计学意义（RPE65：t=1.180,P＞0.05;角蛋白18：t=1.079,P＞0.05）.RT-PCR检测相对mRNA表达量,结果显示第一组和第二组间、第一组和第三组间差异有统计学意义（RPE65/β-actin：t=176.110、174.820,P＜0.05;角蛋白18/β-actin：t=243.230、241.560,P＜0.05）.而第二组和第三组间差异无统计学意义（RPE65/β-actin：t=1.283.P＞0.05;角蛋白18/β-actin：t=1.670,P＞0.05）.结论 利用BDNF、EGF、bFGF联合HRPECs共培养可以使BMSCs分化为视网膜色素上皮样细胞.

摘要： 本发明提供了包含非色素睫状上皮细胞(NPCEC)特异性启动子的构建体。特别是，所述构建体包含赋予NPCEC特异性表达的BEST2最小启动子。所述BEST2最小启动子可以与表达型序列(例如编码目的多肽的基因、调控RNA序列、报告基因等)可操作地连接。此类构建体可以在表达载体中提供，例如，利用与表达型序列可操作地连接的所述BEST2最小启动子提供，或在经此类表达载体遗传修饰的宿主细胞中提供。

摘要： 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用，该方法为向人羊膜上皮细胞中添加含有10‑100mM烟酰胺和1‑10μM曲古抑菌素A的诱导组合物，诱导产生的细胞高表达MITF、PMEL17、RPE65、Bestrophin等视网膜色素上皮细胞的典型基因。将利用该方法诱导产生的细胞注射到RCS大鼠视网膜下腔，通过ERG以及眼底检测发现大鼠眼睛电生理信号明显增强，眼底结构明显改善，眼球切片HE染色显示其视网膜厚度明显增加，经过上述方案诱导分化后的细胞经注射后对大鼠的视力有一定程度的恢复。本发明中的诱导复合物能够用于人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞的分化以及治疗视网膜损伤相关的眼部疾病。

摘要： 本发明涉及一种视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型及其应用。将ARPE‑19细胞用胰酶消化后，再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM‑F12培养基中，并在陪替氏培养皿中培养，即得视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型；该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮－间充质转换的分子机制及寻找上皮－间充质转换的干预靶向。与现有技术相比，本发明方法简单易行、重复性好。

摘要： 本发明涉及一种诱导人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞分化的方法及其在治疗视网膜退行性疾病中的应用，该方法为向人羊膜上皮细胞中添加含有10‑100mM烟酰胺和1‑10μM曲古抑菌素A的诱导组合物，诱导产生的细胞高表达MITF、PMEL17、RPE65、Bestrophin等视网膜色素上皮细胞的典型基因。将利用该方法诱导产生的细胞注射到RCS大鼠视网膜下腔，通过ERG以及眼底检测发现大鼠眼睛电生理信号明显增强，眼底结构明显改善，眼球切片HE染色显示其视网膜厚度明显增加，经过上述方案诱导分化后的细胞经注射后对大鼠的视力有一定程度的恢复。本发明中的诱导复合物能够用于人羊膜上皮细胞向视网膜色素上皮细胞的分化以及治疗视网膜损伤相关的眼部疾病。

摘要： 本发明涉及一种视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型及其应用。将ARPE-19细胞用胰酶消化后，再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM-F12培养基中，并在陪替氏培养皿中培养，即得视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型；该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮－间充质转换的分子机制及寻找上皮－间充质转换的干预靶向。与现有技术相比，本发明方法简单易行、重复性好。

摘要： 本发明涉及从多能干细胞(PSC)制备视网膜色素上皮(RPE)细胞的方法。更具体地，本发明涉及依次组合三种分化剂以使得人多能干细胞定向分化为RPE细胞的自动化方法。

摘要： 本发明涉及一种用于将胚胎干细胞诱导为视网膜色素上皮细胞的培养基及其应用。具体地，本发明涉及使用化学成分完全明确的培养基，将人胚胎干细胞定向高效地诱导生成视网膜色素上皮细胞；本发明还涉及一种用于将胚胎干细胞诱导为视网膜色素上皮细胞的方法及其应用。

摘要： 本发明提供了一种通过分化多能干细胞来生产高纯度视网膜色素上皮(RPE)细胞的改进的方法。

摘要： 本发明公开了视网膜色素上皮细胞与间充质干细胞在制备治疗视网膜退行性疾病的药物中的应用。胎儿来源的视网膜色素上皮细胞与间充质干细胞在制备治疗视网膜退行性疾病的药物中的应用。所述的视网膜退行性疾病优选老年性黄斑变性。本发明将胎儿来源的视网膜色素上皮细胞与间充质干细胞共同移植治疗视网膜退行性疾病模型小鼠，比单纯的fRPE和单纯的MSC移植治疗，对视网膜损伤后修复功能效果更好。并且，共同移植比单纯一种细胞的移植，移植后存活的细胞数更多，光感受器细胞解救效果更强。并且，共同移植显著抑制了退行性疾病模型小鼠的炎症反应，并促进内源性生长因子的分泌。

摘要： 本发明提供了一种恢复视网膜色素上皮(RPE)细胞的溶酶体功能的方法和一种预防和/或治疗受试者中年龄相关性黄斑变性(AMD)、Stargardt黄斑视网膜变性、神经退行性疾病或糖尿病性视网膜病变的方法。所述方法包括向有需要的受试者施用(i)编码包含组成型活性形式的转录因子EB(TFEB)的多肽的核酸或(ii)所述多肽。本发明还提供了相关的多肽、核酸、载体及其组合物。