突变型p53

摘要： 目的 研究晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma, NSCLC)中突变型p53和缺氧诱导因子1α(Hypoxia Inducible Factor-1α,HIF-1α)的表达及临床意义。方法 收集2019年1月1日至2020年10月31日期间在邵阳市中心医院行病理确诊的200例晚期NSCLC患者的癌组织标本及临床病理资料。采用免疫组织化学法,检测突变型p53和HIF-1α在晚期NSCLC组织中的表达,探讨突变型p53和HIF-1α的表达与临床病理特征及预后关系。结果 200例晚期NSCLC患者中,突变型p53和HIF-1α阳性表达分别为107例(53.5%)、147例(73.5%)。有吸烟史、低分化的患者中突变型p53阳性表达率较高(P<0.05);低分化的患者中HIF-1α的阳性表达率较高(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示,突变型p53与HIF-1α的表达在晚期NSCLC中呈正相关(r_s=0.167,P=0.018)。突变型p53阴性表达组、阳性表达组的中位OS分别为10.6个月、7.6个月(P=0.001);HIF-1α阴性表达组、阳性表达组的中位OS分别为10.9个月、8.3个月(P=0.002)。单因素及多因素COX分析显示,突变型p53和HIF-1α与患者的预后相关(P<0.05),是晚期NSCLC预后的独立危险因素。结论 晚期NSCLC患者癌组织中,突变型p53的表达与吸烟史及分化程度相关,HIF-1α的表达与分化程度相关,两者的表达呈正相关。突变型p53和HIF-1α的表达水平可作为晚期NSCLC预后的预测指标。

摘要： 目的探讨突变型p53在颅底脊索瘤中的表达与患者预后及临床特点的关联,并在细胞层面验证突变型p53在颅底脊索瘤中的功能。方法纳入2005年1月—2014年12月在首都医科大学附属北京天坛医院接受手术治疗的颅底脊索瘤患者49例,应用石蜡切片进行免疫组织化学染色,分析突变型p53表达与颅底脊索瘤患者预后及临床特点的关系。应用siRNA敲降脊索瘤细胞系UCH-1中的p53基因,分析敲降前后细胞功能的变化。结果在蛋白水平,突变型p53表达水平是肿瘤术后进展的风险因素,随突变型p53表达水平升高,肿瘤进展风险增加(OR:1.040,95%CI:1.007~1.073,P=0.016);另外,骨质浸润型肿瘤较非浸润型中突变型p53表达升高(t=3.319,P=0.002),质地硬的较质地软的肿瘤突变型p53表达升高(t=-3.503,P=0.001),血供丰富型较不丰富型肿瘤突变型p53表达升高(t=2.081,P=0.043)。细胞水平,与对照组相比,p53敲降组的细胞活力在不同时间点间有差异(F=305.715,P=0.000);p53敲降组细胞凋亡率低于对照组(t=-3.961,P=0.017);与对照组相比,p53敲降组在第6(t=-5.232,P=0.014)、12(t=4.778,P=0.017)及24(t=-9.303,P=0.003)小时穿透至下室的肿瘤细胞均增多。结论颅底脊索瘤中突变型p53表达升高可导致术后肿瘤进展风险增加,其表达与肿瘤质地、侵袭性和血供情况相关;突变型p53表达受抑制后脊索瘤细胞增殖和侵袭能力提高,凋亡减少。

摘要： 目的探讨叉头蛋白3(FOXP3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达、与P53突变的关联及其对Cyclin D1和CDK4表达的调控作用.方法采用免疫组织化学染色法检测NSCLC组织中FOXP3和突变型P53(mt-P53)蛋白表达的相关性,应用脂质体转染法将FOXP3 siRNA瞬时转染到A549细胞中.实验分为A549组、Control-siRNA组和FOXP3-siRNA组.Real-time PCR和Western blotting方法检测FOXP3沉默效果,MTT方法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期情况,Western blotting方法检测Cyclin D1和CDK4的表达水平.结果NSCLC组织中,FOXP3阳性表达率为64.0%,mt-P53阳性表达率为56.0%,二者之间的表达呈显著正相关关系(r=0.342,P=0.015).与A549组和Control-siRNA组相比,FOXP3-siRNA组FOXP3 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01),细胞增殖明显减慢(P<0.01),G 0/G 1期细胞比例明显增加(P<0.05),Cyclin D1和CDK4蛋白的表达水平显著降低(P<0.01).结论NSCLC组织中FOXP3表达与P53突变密切相关,沉默FOXP3可下调Cyclin D1和CDK4的表达,诱发细胞周期G 0/G 1期阻滞,进而抑制NSCLC细胞增殖.

摘要： 目的 研究突变型p53、p63和Ki67的表达和肌层浸润性膀胱癌(muscle invasive bladder cancer,MIBC)预后的相关性.方法 回顾性收集2007年1月至2016年12月在我院因肌层浸润膀胱癌行根治性膀胱切除术患者共99例.根据突变型p53、p63和Ki67的表达情况将病人进行分组,采用Kaplan-Meier法制作生存曲线,采用COX回归模型分析突变型p53、p63和Ki67的表达和MIBC患者的总生存(overall survival,OS)和无病生存(disease-free survival,DFS)的关系.结果 多因素COX生存分析显示单一的突变型p53、p63或Ki67的表达和MIBC的预后没有相关性.突变型p53阳性/p63阳性/Ki67阳性表达≥30％提示MIBC患者更短的OS和DFS.在突变型p53阳性/p63阳性/Ki67阳性表达≥30％的MIBC患者中,辅助化疗组的OS和DFS相比于非化疗组显著提高.结论 突变型p53阳性/p63阳性/Ki67阳性表达≥30％是MIBC手术后预后的独立危险因素.这些患者可能从辅助化疗中获益.

摘要： 目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和突变型p53(mtp53)在胃癌组织中的表达及临床诊断价值.方法 收集37份胃癌组织标本与30份正常胃组织,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)检测标本中的VEGF和mtp53表达情况,并比较VEGF和mtp53在胃癌不同临床病理特征中的表达情况.结果 VEGF和mtp53在胃癌组织的表达阳性率分别为51.4％、59.5％,均高于正常组织的6.7％、13.3％,差异具有统计学意义(P<0.05).VEGF在低分化胃癌中的表达阳性率高于中高分化胃癌,在有淋巴结转移中的表达阳性率高于无淋巴结转移,差异具有统计学意义(P<0.05).mtp53在胃癌浸润浆膜及以外中的表达阳性率高于胃癌浸润未及浆膜,在有淋巴结转移中的表达阳性率明显高于无淋巴结转移,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 VEGF和mtp53在胃癌组织呈过度表达,且与胃癌的临床病理特征有一定的相关性,对胃癌具有辅助诊断价值.

摘要： 野生型p53(wild-type p53,wtp 53)是重要的抑癌基因,也是抗肿瘤药的一个重要靶点.但该基因具有很高的突变频率,存在多个热点突变.突变型p53(mutant type p53,mutp53)因其功能缺失、显性负效应,特别是致癌的功能获得(Gain of function,GOF),加大了肿瘤治疗的难度.本文主要介绍近年来mutp53的GOF研究现状及靶向mutp53的抗肿瘤药物研究进展.

摘要： 目的 探讨聚焦超声治疗对外阴低级别鳞状上皮内病变(LSIL)模型大鼠外阴皮肤中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及突变型p53(mtp53)表达的影响.方法 建立28只外阴LSIL大鼠模型,随机分为治疗组(n=14)及对照组(n=14).治疗组予以聚焦超声辐照,对照组予超声假辐照(治疗仪无功率输出).4周后取模型大鼠外阴皮肤行组织病理学观察,并以免疫组织化学方法检测HIF-1α、VEGF及mtp53表达.结果 聚焦超声辐照/假照后4周治疗组92.86％(13/14)外阴皮肤基本恢复正常生理结构,对照组71.43％(10/14)进展为高级别鳞状上皮内病变(HSIL).治疗组大鼠外阴皮肤中HIF-1α、VEGF及mtp53表达均明显低于对照组(P均＜0.05).结论 聚焦超声可通过降低HIF-1α、VEGF及mtp53表达,改善局部组织微环境而安全、有效治疗大鼠外阴LSIL.

摘要： 目的 检测Ki67和突变型p53在人非瘤脑组织以及不同级别人脑胶质瘤中的表达及其意义.方法 选取2012-12—2018-12间在郑州市第一人民医院经手术和术后病理学确诊的72例脑胶质瘤患者.将Ⅰ ～Ⅱ级低度恶性的40例作为Ⅰ ～Ⅱ级组,将Ⅲ ～Ⅳ级高度恶性的32例作为Ⅲ ～Ⅳ级组.另选取21例非瘤脑组织作为对照组.采用免疫组化法和逆转录多聚酶链反应技术,检测Ki67和突变型p53的表达,并对其相关性进行分析.结果 Ki67和突变型p53在人脑胶质瘤中的表达明显高于对照组,且随着胶质瘤级别的升高而增高,两者在人脑胶质瘤中的表达为正相关(r=0.713,P<0.05).结论 检测Ki67和突变型p53的表达水平有助于判断人脑胶质瘤的级别、分化和预后,可为脑胶质瘤患者提供基因诊断和靶向治疗.

摘要： 肝癌是全球恶性程度极高、预后极差的恶性肿瘤之一，在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第2位。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种，如手术切除、射频消融、化学消融、肝移植等，但这些局部治疗手段对晚期病例，效果都十分有限，迫切需要有效的全身治疗手段的出现。作为目前治疗肿瘤的主要手段，化疗在肝癌的治疗中的地位未被确立.主要原因据认为是原发性肝癌对化疗原发耐药。

摘要： 肝癌是全球恶性程度极高、预后极差的恶性肿瘤之一，在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第2位。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种，如手术切除、射频消融、化学消融、肝移植等，但这些局部治疗手段对晚期病例，效果都十分有限，迫切需要有效的全身治疗手段的出现。作为目前治疗肿瘤的主要手段，化疗在肝癌的治疗中的地位未被确立.主要原因据认为是原发性肝癌对化疗原发耐药。

摘要： 肝癌是全球恶性程度极高、预后极差的恶性肿瘤之一，在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第2位。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种，如手术切除、射频消融、化学消融、肝移植等，但这些局部治疗手段对晚期病例，效果都十分有限，迫切需要有效的全身治疗手段的出现。作为目前治疗肿瘤的主要手段，化疗在肝癌的治疗中的地位未被确立.主要原因据认为是原发性肝癌对化疗原发耐药。

摘要： 肝癌是全球恶性程度极高、预后极差的恶性肿瘤之一，在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第2位。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种，如手术切除、射频消融、化学消融、肝移植等，但这些局部治疗手段对晚期病例，效果都十分有限，迫切需要有效的全身治疗手段的出现。作为目前治疗肿瘤的主要手段，化疗在肝癌的治疗中的地位未被确立.主要原因据认为是原发性肝癌对化疗原发耐药。

摘要： 本发明提供一种突变型甲虫荧光素酶等，其在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型北美萤火虫荧光素酶的氨基酸序列中、第288位的缬氨酸相当的氨基酸突变为异亮氨酸、亮氨酸或苯丙氨酸；与其中第376位的亮氨酸相当的氨基酸突变为脯氨酸；与其中第455位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸；或者与其中第488位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或者苯丙氨酸，并且在0.9质量％的氯化钠溶液中由荧光素－荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含氯化钠的溶液中该反应的发光强度的50％以上。

摘要： 本发明公开了一种突变型尿酸酶、PEG修饰的突变型尿酸酶及其应用，具体地，本发明公开了一种突变型尿酸酶，所述突变型尿酸酶具有重组引入的半胱氨酸残基，并且所述的半胱氨酸残基位于尿酸酶的非活性区域，并且在突变型尿酸酶中偶联一个或多个PEG，得到的PEG化的突变型尿酸酶具有延长半衰期、产物均一化、酶活性稳定的特点，因此，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明属于基因工程领域。涉及一种突变型隐色素基因1和突变型隐色素基因1的转基因猪。本发明还涉及突变型隐色素基因1的核苷酸、核酸构建体、转基因动物细胞或其培养物以及制备非人转基因动物的方法。具体地，所述突变型隐色素基因1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示。本发明制得的转基因猪出现了明显的生物节律紊乱和炎症因子高表达，具有作为筛选治疗和/预防和/或辅助治疗和/或调节生物节律紊乱的药物或者筛选治疗和/预防和/或辅助治疗炎症的药物的潜力。

摘要： 突变型腈水合酶，其是包含α亚基和β亚基的来源于嗜热假诺卡氏菌的腈水合酶，所述突变型腈水合酶中含有选自由α亚基的N末端起第40位及第43位以及β亚基的N末端起第205位、第206位及第215位组成的组中的至少1个位置处的氨基酸残基取代为特定氨基酸残基的取代。

摘要： 本发明的目的在于提供一种突变型甲虫荧光素酶，其不易受到NaCl的发光抑制的影响。本发明的突变型甲虫荧光素酶在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型平家萤荧光素酶的氨基酸序列中的第294位苯丙氨酸相对应的氨基酸突变为缬氨酸或与第533位天冬氨酸相对应的氨基酸突变为缬氨酸，且在0.9质量％的NaCl溶液中由荧光素‑荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含NaCl的溶液中该反应的发光强度的50％以上。

摘要： 本发明提供一种突变型甲虫荧光素酶等，其在编码野生型甲虫荧光素酶的氨基酸序列中，具有以下突变：与野生型北美萤火虫荧光素酶的氨基酸序列中、第288位的缬氨酸相当的氨基酸突变为异亮氨酸、亮氨酸或苯丙氨酸；与其中第376位的亮氨酸相当的氨基酸突变为脯氨酸；与其中第455位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或苯丙氨酸；或者与其中第488位的谷氨酸相当的氨基酸突变为缬氨酸、丙氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或者苯丙氨酸，并且在0.9质量％的氯化钠溶液中由荧光素－荧光素酶发光反应产生的发光强度是在不含氯化钠的溶液中该反应的发光强度的50％以上。

摘要： 本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，涉及一种ACE插入突变型探针。该ACE插入突变型探针特异性地识别第16内含子发生插入突变的ACE基因；所述ACE插入突变型探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述SEQ ID NO:3为5'‑CCAAACTTCACAGTCTCT‑3'。本发明提供的ACE插入突变型探针，能够特异性地识别第16内含子发生插入突变的ACE基因，可用于检测或筛查ACE基因是否发生第16内含子发生插入突变。

摘要： 作为用于使目标蛋白在转化体中以活性的可溶性重组蛋白形式表达的高效的方法，提供一种酶的制造方法，所述酶与基准体相比每种重组体的活性得到提高，该方法包含以下的工序：(1)制作表达突变体的重组体的工序，所述突变体具有在基准体的氨基酸序列中1个以上的半胱氨酸被置换为其它氨基酸残基的氨基酸序列；(2)选择与基准体的活性100％相比显示50％以上的每种重组体的活性的多个突变体的工序；和(3)表达以下突变体的工序，所述突变体为在工序(2)所选择的各个突变体所具有的氨基酸残基被置换的部位中的2个以上部位中、各自对应的氨基酸残基被置换的突变体。

摘要： 本发明公开了一种突变型尿酸酶、PEG修饰的突变型尿酸酶及其应用，具体地，本发明公开了一种突变型尿酸酶，所述突变型尿酸酶具有重组引入的半胱氨酸残基，并且所述的半胱氨酸残基位于尿酸酶的非活性区域，并且在突变型尿酸酶中偶联一个或多个PEG，得到的PEG化的突变型尿酸酶具有延长半衰期、产物均一化、酶活性稳定的特点，因此，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明属于基因工程领域。涉及一种突变型隐色素基因1和突变型隐色素基因1的转基因猪。本发明还涉及突变型隐色素基因1的核苷酸、核酸构建体、转基因动物细胞或其培养物以及制备非人转基因动物的方法。具体地，所述突变型隐色素基因1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示。本发明制得的转基因猪出现了明显的生物节律紊乱和炎症因子高表达，具有作为筛选治疗和/预防和/或辅助治疗和/或调节生物节律紊乱的药物或者筛选治疗和/预防和/或辅助治疗炎症的药物的潜力。