具有高产α-环糊精能力的环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及突变方法

摘要

具有高产α-环糊精能力的环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及突变方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明改进环糊精葡萄糖基转移酶(简称CGT酶)的产物特异性，提供了提高来源于Peanibacillus macerans JFB 05-01(CCTCC NO：M 208063)的CGT酶产α-环糊精能力的突变方案，将CGT酶的372位的Asp替换为Lys，89位的Tyr分别替换为Asp及Arg，分别获得单突变体酶D372K，Y89D及Y89R，它们的α-环糊精生产能力较野生型CGT酶有所提高；将带有Lys372的CGT酶的基因片段替代Y89R基因的相应片段，可获得双突变体酶D372K/Y89R，其α-环糊精产量比野生型CGT酶增加了1.5倍，而β-环糊精产量降低了57％。这些突变体比野生型CGT酶更利于α-环糊精的生产。