一步法实时荧光RT-PCR反应缓冲液及其反应体系和PCR方法

摘要

本发明涉及一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液及其反应体系和PCR方法,该一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液包括如下原料：三羟甲基氨基甲烷‑盐酸缓冲液、氯化钾、氯化镁、硫酸铵、二甲基亚砜、脱氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐温20、三氮化钠、Rox参比染料、去离子水。该一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液增加了NH4+和N3‑，提高PCR反应效率，适用于PCR技术的高效扩增型和灵敏检测，其不仅具有稳定性好，荧光效果佳、灵敏度高的优点。该实时荧光PCR方法，通过采用一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液配置成荧光RT‑PCR反应体系，其具有结果可靠和准确灵敏、操作简单、省时省力、降低检测成本，提高检查效率等优点。