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基于TdT-RCA的传感器及其在DNA甲基转移酶检测中的应用

摘要

本发明提供一种基于TdT‑RCA的传感器及其在DNA甲基转移酶检测中的应用,该传感器包括:Dam甲基转移酶检测探针、哑铃状滚环模板。本发明通过对甲基转移酶作用的底物发夹探针3’末端进行氨基化修饰有效地防止末端转移酶(TdT)激活的非特异性扩增,降低了背景信号,从而极大提高本发明检测方法的特异性;将TdT催化的引物延伸和哑铃状模板介导的滚环扩增(RCA)反应结合,以硫黄素T(ThT)为荧光染料(与反应产物G三链特异结合作为信号输出)无需荧光标记,操作简单,降低了实验成本;能较好区分Dam甲基转移酶和其他甲基转移酶,具有较好的选择性。

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