一种中华鳖基因组微卫星多重PCR体系构建方法

摘要

本发明公开了一种使用公共数据，快速构建中华鳖10×以上多重PCR体系的技术方法，其主要特征在于：1)使用公共数据库，获取中华鳖基因组序列；2)使用MISA软件对中华鳖基因组序列进行分析，使用Primer 3进行批量引物设计，使用使用AutoDimer软件计算多态位点引物序列的相容性；3)保留引物序列相容性最强的10‑12个位点构建多重PCR体系，按照每个位点上游引物0.4μM，下游引物10μM的浓度配制引物预混液，然后将全部位点的引物预混液等体积混合配制多重PCR引物工作液；4)使用常规PCR方法对多重PCR体系进行扩增，使用毛细管电泳对扩增产物进行基因分型。本发明构建的多重PCR体系，标记通量高，基因分型结果准确、快速，可为中华鳖遗传育种等研究工作提供分子工具。