泥蚶性腺组织生殖细胞分离与培养的方法

摘要

本发明公开泥蚶性腺组织生殖细胞分离与培养的方法，先在无菌条件下用无菌注射器吸取泥蚶性腺组织，消毒，用含0.05％胰酶和0.2％胶原酶的混合液，23℃条件下消化酶解性腺组织，收集细胞悬液，离心，去除上清，沉淀的细胞用消毒缓冲液悬浮，雄性性腺组织取精细胞时的水平离心速度为2600rpm/m，雌性性腺组织取卵细胞的水平离心速度为1600rpm/m，取细胞悬浮液，铺6孔板，在26℃生化培养箱中倒置贴壁培养24h，然后正置，每孔加入1mL培养基，此后每2d更换一半培养基，恒温静置培养5‑10d，进行原代培养，本发明通过大量的基础实验选择泥蚶性腺组织的培养条件，使得性腺细胞能够在体外分离、纯化、培养并存活。